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6T-CEM
Pañuelo de papel
Sangre periférica
Enfermedad
Leucemia linfoblástica aguda de células T
Sinónimos
6-T CEM

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6T-CEM

Cell line · Número de producto 305132

La línea celular 6T-CEM es un derivado mutante de la línea celular T CCRF-CEM, procedente de la leucemia linfoblástica aguda (LLA) humana. Se desarrolló sometiendo a la línea parental...

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01Información general

Descripción

La línea celular 6T-CEM es un derivado mutante de la línea celular T CCRF-CEM de la leucemia linfoblástica aguda (LLA) humana. Se desarrolló mediante la exposición de las células madre CEM a 6-tioguanina, lo que condujo a la selección de una sublínea que presenta resistencia a este compuesto. Esta resistencia es el resultado de la inactivación del gen HPRT, que es crítico en la vía de salvamento de purinas. Las células 6T-CEM han sido especialmente valiosas para estudiar los mecanismos de resistencia a los fármacos, sobre todo en lo que respecta a los análogos de las purinas como la 6-tioguanina. Además, estas células se caracterizan por su secreción de un factor inductor supresor de células T (SIF) único, que no sólo no es mitogénico ni citotóxico, sino que también es capaz de suprimir la proliferación de células T al tiempo que evita la proliferación de células B a determinadas diluciones.

las células 6T-CEM y sus subclones, como 6T-CEM-20, han mostrado un aumento significativo en la producción de este factor supresor-inductor, que tiene aplicaciones potenciales en la investigación inmunológica, particularmente en el estudio de la regulación de las células T y la inmunosupresión. Se ha demostrado que el SIF secretado por estas células suprime hasta el 90% de la proliferación de células T inducida por mitógenos a diluciones extremadamente altas (hasta 10^-9), lo que convierte a estas células en un potente modelo para explorar estrategias terapéuticas que impliquen la modulación de la respuesta inmunitaria. El uso de estas células en diversos montajes experimentales ha permitido comprender mejor los fundamentos moleculares de la inmunosupresión, con posibles implicaciones para el desarrollo de tratamientos de enfermedades autoinmunes y en el contexto del trasplante de órganos para prevenir el rechazo del injerto.

Pañuelo de papel
Sangre periférica
Enfermedad
Leucemia linfoblástica aguda de células T
Sinónimos
  • 6-T CEM

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
Linfoblasto

04Identificadores

Referencia
6T-CEM (número de catálogo 305132 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6869

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
MEM alfa, con: 2,0 mM de glutamina estable, sin Ribonucleósidos, w/o: Desoxirribonucleósidos, w: 1,0 mM Piruvato sódico, w: 2,2g/L NaHCO3
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Subcultivo
Homogeneice suavemente la suspensión celular en el matraz pipeteando hacia arriba y hacia abajo, y luego tome una muestra representativa para determinar la densidad celular por ml. Diluya la suspensión para alcanzar una concentración celular de 1 x 105 células/ml con medio de cultivo fresco, y divida la suspensión ajustada en nuevos matraces para su posterior cultivo.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
4 años
Origen étnico
Asiático