Gå direkt till innehållet
6T-CEM
Vävnad
Perifert blod
Sjukdom
T-cells akut lymfatisk leukemi
Synonymer
6-T CEM

6T-CEM

Cell line · Produktnummer 305132

Cellinjen 6T-CEM är en muterad variant av den humana T-cellinjen CCRF-CEM, som härrör från akut lymfoblastisk leukemi (ALL). Den utvecklades genom att utsätta moderlinjen ...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen 6T-CEM är ett mutant derivat av den humana T-cellinjen CCRF-CEM för akut lymfatisk leukemi (ALL). Den utvecklades genom att exponera de ursprungliga CEM-cellerna för 6-tioguanin, vilket ledde till att en sublinje som uppvisar resistens mot denna förening valdes ut. Denna resistens är ett resultat av inaktiveringen av HPRT-genen, som är kritisk i purinåtervinningsvägen. 6T-CEM-cellerna har varit särskilt värdefulla för att studera mekanismer för läkemedelsresistens, särskilt när det gäller purinanaloger som 6-tioguanin. Dessutom kännetecknas dessa celler av att de utsöndrar en unik T-cell suppressor inducer factor (SIF), som inte bara är icke-mitogen och icke-cytotoxisk utan också kan undertrycka T-cellsproliferation samtidigt som den skonar B-cellsproliferation vid vissa utspädningar.

6T-CEM-celler och deras subkloner, som 6T-CEM-20, har visat en signifikant ökning av produktionen av denna suppressor-inducer factor, som har potentiella tillämpningar inom immunologisk forskning, särskilt i studier av T-cellsreglering och immunundertryckande. Den SIF som utsöndras av dessa celler har visat sig undertrycka upp till 90% av den mitogeninducerade T-cellsproliferationen vid extremt höga spädningsgrader (upp till 10^-9), vilket gör dessa celler till en potent modell för att utforska terapeutiska strategier som innefattar modulering av immunsvaret. Användningen av dessa celler i olika experimentella uppställningar har gett insikter i de molekylära grunderna för immunhämning, med potentiella konsekvenser för utvecklingen av behandlingar för autoimmuna sjukdomar och i samband med organtransplantation för att förhindra avstötning av transplantat.

Vävnad
Perifert blod
Sjukdom
T-cells akut lymfatisk leukemi
Synonymer
  • 6-T CEM

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Upphängning
Biosäkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblast

04Identifierare

Källa
6T-CEM (Cytion katalognummer 305132)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6869

05Hantering och odling

Odlingsmedium
Alpha MEM, med: 2,0 mM stabilt glutamin, utan Ribonukleosider, w/o: Deoxyribonukleosider, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Vidareodling
Homogenisera försiktigt cellsuspensionen i kolven genom att pipettera upp och ner, och ta sedan ett representativt prov för att bestämma celltätheten per ml. Späd suspensionen till en cellkoncentration på 1 x 105 celler/ml med färskt odlingsmedium och fördela den justerade suspensionen i nya kolvar för vidare odling.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
4 år
Etnicitet
Asiat