Přejít na obsah
6T-CEM
Tkáň
Periferní krev
Nemoc
T-buněčná akutní lymfoblastická leukémie
Synonyma
6-T CEM

Dokumenty

6T-CEM

Cell line · Číslo výrobku 305132

Buněčná linie 6T-CEM je mutovaný derivát lidské T-buněčné linie CCRF-CEM pocházející z akutní lymfoblastické leukémie (ALL). Byla vyvinuta vystavením mateřské ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie 6T-CEM je mutantní derivát lidské akutní lymfoblastické leukemie (ALL) T-buněčné linie CCRF-CEM. Byla vyvinuta vystavením mateřských buněk CEM 6-thioguaninu, což vedlo k selekci podlinie, která vykazuje rezistenci vůči této sloučenině. Tato rezistence je důsledkem inaktivace genu HPRT, který je kritický pro purinovou salvage dráhu. Buňky 6T-CEM jsou zvláště cenné při studiu mechanismů rezistence k léčivům, zejména pokud jde o purinová analoga, jako je 6thioguanin. Tyto buňky se navíc vyznačují vylučováním jedinečného indukčního faktoru (SIF), který nejenže není mitogenní a cytotoxický, ale je také schopen potlačovat proliferaci T-buněk a zároveň šetřit proliferaci B-buněk v určitých ředěních.

buňky 6T-CEM a jejich subklony, jako například 6T-CEM-20, vykazují výrazné zvýšení produkce tohoto supresorového indukčního faktoru, který má potenciální využití v imunologickém výzkumu, zejména při studiu regulace T-buněk a imunitní suprese. Bylo prokázáno, že SIF vylučovaný těmito buňkami potlačuje až 90 % mitogenem indukované proliferace T-buněk při extrémně vysokých ředěních (až 10^-9), což z těchto buněk činí účinný model pro zkoumání terapeutických strategií, které zahrnují modulaci imunitní odpovědi. Použití těchto buněk v různých experimentálních sestavách umožnilo nahlédnout do molekulárních základů imunitní suprese, což má potenciální důsledky pro vývoj léčby autoimunitních onemocnění a v souvislosti s transplantací orgánů s cílem zabránit odmítnutí štěpu.

Tkáň
Periferní krev
Nemoc
T-buněčná akutní lymfoblastická leukémie
Synonyma
  • 6-T CEM

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Lymfoblasty

04Identifikátory

Citace
6T-CEM (katalogové číslo Cytion 305132)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6869

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w/o: Ribonukleosidy, w/o: Deoxyribonukleosidy, w: 1,0 mM Pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Subkultivace
Jemně homogenizujte buněčnou suspenzi v baňce pipetováním nahoru a dolů, poté odeberte reprezentativní vzorek pro stanovení buněčné hustoty na ml. Suspenzi zřeďte čerstvým kultivačním médiem tak, aby koncentrace buněk byla 1 x 105 buněk/ml, a upravenou suspenzi rozdělte do nových baňek pro další kultivaci.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
4 roky
Etnická příslušnost
Asijské