Mine otse sisu juurde
6T-CEM
Kude
Perifeerne veri
Haigus
T-rakuline äge lümfoblastiline leukeemia
Sünonüümid
6-T CEM

Dokumendid

6T-CEM

Cell line · Toote number 305132

Rakuliin 6T-CEM on inimese ägeda lümfoblastilise leukeemia (ALL) T-rakuliini CCRF-CEM mutatsiooniline derivaat. See töötati välja, allutades emarakuliini ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

6T-CEM rakuliin on inimese ägeda lümfoblastse leukeemia (ALL) T-rakkude liini CCRF-CEM mutantne derivaat. See on välja töötatud, kui CEM-vanuserakud eksponeeriti 6-tioguaniinile, mille tulemusena valiti välja alamliin, mis on selle ühendi suhtes resistentne. See resistentsus on tingitud HPRT-geeni inaktiveerimisest, mis on kriitilise tähtsusega puriinide päästeteel. 6T-CEM rakud on olnud eriti väärtuslikud ravimresistentsuse mehhanismide uurimisel, eriti seoses puriini analoogidega, nagu 6-tioguaniin. Lisaks sellele iseloomustab neid rakke ainulaadse T-rakkude supressori indutseeriva faktori (SIF) sekretsioon, mis ei ole mitte ainult mittemidogeenne ja mittetsütotoksiline, vaid on ka võimeline pärssima T-rakkude proliferatsiooni, säästes samas B-rakkude proliferatsiooni teatud lahjenduste juures.

6T-CEM rakud ja nende alamkloonid, nagu 6T-CEM-20, on näidanud selle supressor-indutseeriva faktori tootmise märkimisväärset suurenemist, millel on potentsiaalsed rakendused immunoloogilistes uuringutes, eriti T-rakkude regulatsiooni ja immuunsupressiooni uurimisel. On näidatud, et nende rakkude poolt eritatav SIF pärsib kuni 90% mitogeeni poolt indutseeritud T-rakkude proliferatsiooni äärmiselt suurtes lahjendustes (kuni 10^-9), mis muudab need rakud tõhusaks mudeliks immuunvastuse moduleerimisega seotud terapeutiliste strateegiate uurimiseks. Nende rakkude kasutamine erinevates eksperimentaalsetes seadeldistes on andnud ülevaate immuunsupressiooni molekulaarsetest alustest, mis võib mõjutada autoimmuunhaiguste ravi väljatöötamist ja elundisiirdamise kontekstis, et vältida siirdandi hülgamist.

Kude
Perifeerne veri
Haigus
T-rakuline äge lümfoblastiline leukeemia
Sünonüümid
  • 6-T CEM

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastid

04Tunnused

Viide
6T-CEM (Cytioni katalooginumber 305132)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_6869

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w/o: Ribonukleosiidid, w/o: Deoksüribonukleosiidid, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Homogeniseerige kolvis olev rakususpensioon õrnalt pipeteerides üles-alla, seejärel võtke representatiivne proov, et määrata rakkude tihedus ml kohta. Lahjendage suspensiooni värske kultuurikeskkonnaga, et saavutada rakkude kontsentratsioon 1 x 105 rakku/ml, ja jaotage reguleeritud suspensioon uute kolvide vahel edasiseks kasvatamiseks.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
4 aastat
Etniline kuuluvus
Aasia