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6T-CEM
Tecido
Sangue periférico
Doença
Leucemia linfoblástica aguda de células T
Sinónimos
6-T CEM

Documentos

6T-CEM

Cell line · Número do produto 305132

A linha celular 6T-CEM é um derivado mutante da linha celular T CCRF-CEM, proveniente da leucemia linfoblástica aguda (LLA) humana. Foi desenvolvida através da exposição da linha parental...

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01Informações gerais

Descrição

A linha de células 6T-CEM é um derivado mutante da linha de células T de leucemia linfoblástica aguda humana (ALL) CCRF-CEM. Foi desenvolvida expondo as células parentais CEM à 6-tioguanina, o que levou à seleção de uma sub-linhagem que apresenta resistência a este composto. Esta resistência resulta da inativação do gene HPRT, que é fundamental na via de recuperação das purinas. As células 6T-CEM têm sido particularmente valiosas no estudo dos mecanismos de resistência aos medicamentos, especialmente no que respeita aos análogos da purina, como a 6-tioguanina. Além disso, estas células caracterizam-se pela sua secreção de um fator indutor supressor de células T (SIF) único, que não só não é mitogénico e não é citotóxico, como também é capaz de suprimir a proliferação de células T, poupando a proliferação de células B em determinadas diluições.

as células 6T-CEM e os seus subclones, como a 6T-CEM-20, revelaram um aumento significativo da produção deste fator supressor-indutor, que tem aplicações potenciais na investigação imunológica, nomeadamente no estudo da regulação das células T e da imunossupressão. O SIF segregado por estas células demonstrou suprimir até 90% da proliferação de células T induzida por mitogénios a diluições extremamente elevadas (até 10^-9), tornando estas células um modelo potente para explorar estratégias terapêuticas que envolvam a modulação da resposta imunitária. A utilização destas células em várias configurações experimentais permitiu compreender os fundamentos moleculares da supressão imunitária, com potenciais implicações para o desenvolvimento de tratamentos para doenças auto-imunes e no contexto do transplante de órgãos para evitar a rejeição do enxerto.

Tecido
Sangue periférico
Doença
Leucemia linfoblástica aguda de células T
Sinónimos
  • 6-T CEM

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
Linfoblasto

04Identificadores

Referência
6T-CEM (número de catálogo da Cytion 305132)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6869

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
MEM alfa, com: Glutamina estável a 2,0 mM, sem: Ribonucleósidos, s/: Desoxirribonucleósidos, u: 1,0 mM Piruvato de sódio, u: 2,2g/L NaHCO3
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Subcultura
Homogeneize suavemente a suspensão celular no frasco pipetando para cima e para baixo e, em seguida, recolha uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão para atingir uma concentração celular de 1 x 105 células/ml com meio de cultura fresco e alique a suspensão ajustada em novos frascos para cultivo adicional.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
4 anos
Etnia
Asiático