Ga naar de inhoud
6T-CEM
Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
T-cel acute lymfoblastische leukemie
Synoniemen
6-T CEM

Documenten

6T-CEM

Cell line · Productnummer 305132

De 6T-CEM-cellijn is een mutante afstammeling van de CCRF-CEM-T-cellijn, afkomstig van acute lymfatische leukemie (ALL) bij de mens. Deze cellijn is ontwikkeld door de oorspronkelijke ...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De 6T-CEM cellijn is een gemuteerde afgeleide van de menselijke acute lymfoblastaire leukemie (ALL) T-cellijn CCRF-CEM. De lijn werd ontwikkeld door de oudercellen van CEM bloot te stellen aan 6-thioguanine, wat leidde tot de selectie van een sublijn die resistent is tegen deze verbinding. Deze resistentie is het gevolg van de inactivatie van het HPRT-gen, dat een cruciale rol speelt in de purinesalvagepathway. De 6T-CEM cellen zijn bijzonder waardevol gebleken bij het bestuderen van resistentiemechanismen tegen geneesmiddelen, vooral met betrekking tot purine-analogen zoals 6-thioguanine. Daarnaast worden deze cellen gekenmerkt door hun afscheiding van een unieke T-cel suppressor inducer factor (SIF), die niet alleen niet-mitogeen en niet-cytotoxisch is, maar ook in staat is om de T-cel proliferatie te onderdrukken en de B-cel proliferatie te sparen bij bepaalde verdunningen.

6T-CEM cellen en hun subklonen, zoals 6T-CEM-20, hebben een significante toename laten zien in de productie van deze suppressor-inducer factor, die potentiële toepassingen heeft in immunologisch onderzoek, met name in de studie van T-cel regulatie en immuunsuppressie. Er is aangetoond dat de SIF die door deze cellen wordt uitgescheiden tot 90% van de mitogeen-geïnduceerde T-celproliferatie onderdrukt bij extreem hoge verdunningen (tot 10^-9), waardoor deze cellen een krachtig model vormen voor het onderzoeken van therapeutische strategieën waarbij de immuunrespons wordt gemoduleerd. Het gebruik van deze cellen in verschillende experimentele opstellingen heeft inzichten opgeleverd in de moleculaire onderbouwing van immuunsuppressie, met mogelijke implicaties voor de ontwikkeling van behandelingen voor auto-immuunziekten en in de context van orgaantransplantatie om afstoting van transplantaten te voorkomen.

Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
T-cel acute lymfoblastische leukemie
Synoniemen
  • 6-T CEM

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Lymfoblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
6T-CEM (Cytion catalogusnummer 305132)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6869

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w/o: Ribonucleosiden, w/o: Deoxyribonucleosiden, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Heruitplanten
Homogeniseer de celsuspensie in de kolf voorzichtig door op en neer te pipetteren en neem vervolgens een representatief monster om de celdichtheid per ml te bepalen. Verdun de suspensie tot een celconcentratie van 1 x 105 cellen/ml met vers kweekmedium en verdeel de aangepaste suspensie in nieuwe kolven voor verdere kweek.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
4 jaar
Etnische afkomst
Aziatisch