Pereiti prie turinio
MEC-1
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Lėtinė limfocitinė leukemija
Sinonimai
MEC1

Dokumentai

MEC-1

Cell line · Prekės numeris 305434

The MEC-1 cell line is derived from a patient with chronic lymphocytic leukemia (CLL) in the prolymphocytoid transformation stage. It serves as a critical...

€420.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

MEC-1 ląstelių linija yra išskirta iš paciento, sergančio lėtine limfocitine leukemija (LLL), esant prolimfocitinei transformacijos stadijai. Ji yra svarbus modelis, skirtas B ląstelių piktybinių navikų biologijai tirti, ypač molekulinėms mechanizmams, lemiančioms LLL, ir jos reakcijoms į gydymą. MEC-1 ląstelėms būdinga CD19 ir CD5 žymenų ekspresija, atitinkanti jų kilmę iš CLL, ir jos plačiai naudojamos chemoresistentiškumo bei metabolinių adaptacijų leukemijoje mechanizmams tirti.

Tyrimai, kuriuose naudojamos MEC-1 ląstelės, leido geriau suprasti naviko mikroaplinkos ir leukemijos ląstelių išlikimo sąveiką. Pavyzdžiui, ši ląstelių linija buvo labai svarbi nustatant atsparumo tikslinėms terapijoms, tokioms kaip Bcl-2 antagonistas venetoklaksas, mechanizmus. Atspariuose MEC-1 dariniuose (MEC-1 VER) buvo pastebėta p38 MAPK perprodukcija ir pokyčiai proapoptozinių bei antiapoptozinių baltymų ekspresijoje. Tai pabrėžia galimybę taikyti terapiją, nukreiptą į tokius signalinius kelius kaip p38 MAPK ir imunoproteasomą, siekiant įveikti atsparumą vaistams.

Hipoksinėmis sąlygomis MEC-1 ląstelės patiria metabolinį perprogramavimą, kuris palaiko jų išlikimą ir proliferaciją. Šis prisitaikymas apima padidėjusią gliukozės transporterių, tokių kaip GLUT1 ir GLUT3, ekspresiją, taip pat glikolizės ir laktato gamybos pokyčius, kuriuos reguliuoja hipoksijos indukuojami faktoriai (HIF). Be to, tyrimai, kuriuose CRISPR/Cas9 technologija buvo panaudota konkrečių mikroRNR, pavyzdžiui, miR-155, delecijai, atskleidė jų vaidmenį reguliuojant MEC-1 ląstelių metabolizmą ir proliferaciją hipoksinio streso sąlygomis, o tai atveria naujas galimybes terapiniam įsikišimui.

Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Lėtinė limfocitinė leukemija
Sinonimai
  • MEC1

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Adherentinis ir suspensinis
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į limfoblastus panašus
Ląstelių tipas
B ląstelė

04Identifikatoriai

Nuoroda
MEC-1 (Cytion katalogo numeris 305434)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1870

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
Mutacija: TP53, p.Gln317Profs*20 (c.949dupC) (c.949_950insC), homozigotinė; Genų susijungimas: R3HCC1L-HTRA1
Virusai
Transformantas: Epšteino-Barro virusas (EBV)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
IMDM, w: 4,5 g/l gliukozės, w: 4 mM L-glutamino, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natrio piruvato, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820800a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Sėjos tankis
3–5 × 10⁵/ml
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
61 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių