Přejít na obsah
MEC-1
Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Chronická lymfocytární leukémie
Synonyma
MEC1

Dokumenty

MEC-1

Cell line · Číslo výrobku 305434

The MEC-1 cell line is derived from a patient with chronic lymphocytic leukemia (CLL) in the prolymphocytoid transformation stage. It serves as a critical...

€420.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie MEC-1 pochází od pacienta s chronickou lymfocytární leukémií (CLL) ve stadiu prolymfocytoidní transformace. Slouží jako klíčový model pro zkoumání biologie malignit B-buněk, zejména molekulárních mechanismů, na nichž je založena CLL, a jejích reakcí na léčbu. Buňky MEC-1 se vyznačují expresí markerů CD19 a CD5, což odpovídá jejich původu v CLL, a jsou široce využívány ke studiu mechanismů chemorezistence a metabolických adaptací u leukémie.

Výzkum využívající buňky MEC-1 poskytl poznatky o vzájemném působení mezi mikroprostředím nádoru a přežitím leukemických buněk. Tato buněčná linie například sehrála klíčovou roli při identifikaci mechanismů rezistence vůči cíleným terapiím, jako je například antagonista Bcl-2 venetoklax. U rezistentních derivátů MEC-1 (MEC-1 VER) byla pozorována nadměrná exprese p38 MAPK a změny v expresi proapoptotických a antiapoptotických proteinů. To zdůrazňuje potenciál cílení na signální dráhy, jako je p38 MAPK a imunoproteasom, k překonání lékové rezistence.

V hypoxických podmínkách vykazují buňky MEC-1 metabolické přeprogramování, které podporuje jejich přežití a proliferaci. Tato adaptace zahrnuje zvýšenou expresi transportérů glukózy, jako jsou GLUT1 a GLUT3, stejně jako změny v glykolýze a produkci laktátu, které jsou regulovány faktory indukovatelnými hypoxií (HIF). Studie zahrnující deleci specifických mikroRNA, jako je miR-155, zprostředkovanou systémem CRISPR/Cas9 navíc odhalily jejich roli v regulaci metabolismu a proliferace buněk MEC-1 v podmínkách hypoxického stresu, což otevírá další možnosti pro terapeutické zásahy.

Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Chronická lymfocytární leukémie
Synonyma
  • MEC1

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Adhezivní a suspenzní
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Lymfoblastům podobné
Typ buňky
B buňka

04Identifikátory

Citace
MEC-1 (katalogové číslo Cytion 305434)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1870

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: TP53, p.Gln317Profs*20 (c.949dupC) (c.949_950insC), homozygotní; Genová fúze: R3HCC1L-HTRA1
Viry
Transformant: Epstein-Barrové (EBV)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
IMDM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM pyruvátu sodného, w: 3,024 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820800a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Hustota výsevu
3–5 × 10⁵/ml
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
61 let
Etnická příslušnost
Kavkazský