Prejsť na obsah
MEC-1
Tkanivo
Periférna krv
Choroba
Chronická lymfocytárna leukémia
Synonymá
MEC1

Dokumenty

MEC-1

Cell line · Číslo výrobku 305434

The MEC-1 cell line is derived from a patient with chronic lymphocytic leukemia (CLL) in the prolymphocytoid transformation stage. It serves as a critical...

€420.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka MEC-1 pochádza od pacienta s chronickou lymfocytovou leukémiou (CLL) v štádiu prolymfocytoidnej transformácie. Slúži ako kľúčový model na skúmanie biológie malignít B-buniek, najmä molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom CLL a jej reakcií na liečbu. Bunky MEC-1 sa vyznačujú expresiou markerov CD19 a CD5, čo zodpovedá ich pôvodu v CLL, a široko sa využívajú na štúdium mechanizmov chemorezistencie a metabolických adaptácií pri leukémii.

Výskum využívajúci bunky MEC-1 poskytol poznatky o vzájomnom pôsobení medzi mikroprostredím nádoru a prežitím leukemických buniek. Táto bunková línia napríklad zohrala kľúčovú úlohu pri identifikácii mechanizmov rezistencie voči cieleným terapiám, ako je antagonista Bcl-2 venetoklax. V rezistentných derivátoch MEC-1 (MEC-1 VER) bola pozorovaná nadmerná expresia p38 MAPK a zmeny v expresii proapoptotických a antiapoptotických proteínov. To poukazuje na potenciál zamerania sa na signálne dráhy, ako je p38 MAPK a imunoproteazóm, s cieľom prekonať liekovú rezistenciu.

V hypoxických podmienkach vykazujú bunky MEC-1 metabolické preprogramovanie, ktoré podporuje ich prežitie a proliferáciu. Táto adaptácia zahŕňa zvýšenú expresiu transportérov glukózy, ako sú GLUT1 a GLUT3, ako aj zmeny v glykolýze a produkcii laktátu, ktoré sú regulované faktormi indukovateľnými hypoxiou (HIF). Okrem toho štúdie zahŕňajúce deléciu špecifických mikroRNA, ako je miR-155, sprostredkovanú CRISPR/Cas9, odhalili ich úlohu v regulácii metabolizmu a proliferácie buniek MEC-1 v podmienkach hypoxického stresu, čím poskytli ďalšie možnosti pre terapeutickú intervenciu.

Tkanivo
Periférna krv
Choroba
Chronická lymfocytárna leukémia
Synonymá
  • MEC1

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Adhézia a suspenzia
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Lymfoblastom podobné
Typ bunky
B bunka

04Identifikátory

Citácia
MEC-1 (katalógové číslo Cytion 305434)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1870

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia: TP53, p.Gln317Profs*20 (c.949dupC) (c.949_950insC), homozygotná; Génová fúzia: R3HCC1L-HTRA1
Vírusy
Transformant: Epstein-Barrovej (EBV)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
IMDM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM pyruvátu sodného, w: 3,024 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820800a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Hustota výsevu
3–5 × 10⁵/ml
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
61 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský