Gå direkte til indholdet
MEC-1
Væv
Perifert blod
Sygdom
Kronisk lymfatisk leukæmi
Synonymer
MEC1

Dokumenter

MEC-1

Cell line · Varenummer 305434

The MEC-1 cell line is derived from a patient with chronic lymphocytic leukemia (CLL) in the prolymphocytoid transformation stage. It serves as a critical...

€420.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

MEC-1-cellelinjen stammer fra en patient med kronisk lymfocytisk leukæmi (CLL) i det prolymfocytoide transformationsstadium. Den fungerer som en vigtig model til undersøgelse af biologien bag B-celle-maligniteter, især de molekylære mekanismer, der ligger til grund for CLL, samt sygdommens reaktioner på behandlinger. MEC-1-celler er kendetegnet ved ekspression af CD19- og CD5-markører, hvilket stemmer overens med deres oprindelse i CLL, og de anvendes i vid udstrækning til at undersøge mekanismerne bag kemoresistens og metaboliske tilpasninger ved leukæmi.

Forskning med anvendelse af MEC-1-celler har givet indsigt i samspillet mellem tumorens mikromiljø og leukæmicellernes overlevelse. Denne cellelinje har f.eks. været afgørende for at identificere mekanismer for resistens over for målrettede behandlinger, såsom Bcl-2-antagonisten venetoclax. I resistente MEC-1-derivater (MEC-1 VER) er der observeret overekspression af p38 MAPK samt ændringer i ekspressionen af pro-apoptotiske og anti-apoptotiske proteiner. Dette understreger potentialet i at målrette indsatsen mod signalveje som p38 MAPK og immunoproteasomet for at overvinde lægemiddelresistens.

Under hypoxiske forhold udviser MEC-1-celler en metabolisk omprogrammering, der understøtter deres overlevelse og proliferation. Denne tilpasning indebærer øget ekspression af glukosetransportører som GLUT1 og GLUT3 samt ændringer i glykolysen og laktatproduktionen, som reguleres af hypoxi-inducerbare faktorer (HIF’er). Derudover har undersøgelser, der involverer CRISPR/Cas9-medieret sletning af specifikke mikroRNA'er, såsom miR-155, afsløret deres rolle i reguleringen af MEC-1-cellernes stofskifte og proliferation under hypoxisk stress, hvilket åbner yderligere muligheder for terapeutisk intervention.

Væv
Perifert blod
Sygdom
Kronisk lymfatisk leukæmi
Synonymer
  • MEC1

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Adhæsion og suspension
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Lymfoblast-lignende
Celletype
B-celle

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MEC-1 (Cytion-katalognummer 305434)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1870

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Mutation: TP53, p.Gln317Profs*20 (c.949dupC) (c.949_950insC), homozygot; Genfusion: R3HCC1L-HTRA1
Vira
Transformant: Epstein-Barr-virus (EBV)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
IMDM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820800a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Såtæthed
3–5 × 10⁵/ml
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
61 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk