MEC-1

Linia komórkowa MEC-1 pochodzi od pacjenta z przewlekłą białaczką limfocytową (CLL) w stadium transformacji prolimfocytowej. Stanowi ona kluczowy model do badania biologii nowotworów z komórek B, a w szczególności mechanizmów molekularnych leżących u podstaw CLL oraz reakcji tej choroby na terapie. Komórki MEC-1 charakteryzują się ekspresją markerów CD19 i CD5, co jest zgodne z ich pochodzeniem z CLL, i są szeroko wykorzystywane do badania mechanizmów oporności na chemioterapię oraz adaptacji metabolicznych w białaczce.

Badania z wykorzystaniem komórek MEC-1 dostarczyły wiedzy na temat wzajemnego oddziaływania między mikrośrodowiskiem nowotworowym a przeżywalnością komórek białaczkowych. Na przykład ta linia komórkowa odegrała kluczową rolę w identyfikacji mechanizmów oporności na terapie celowane, takie jak antagonista Bcl-2 – wenetoklaks. W opornych pochodnych linii MEC-1 (MEC-1 VER) zaobserwowano nadekspresję p38 MAPK oraz zmiany w ekspresji białek proapoptotycznych i antyapoptotycznych. Podkreśla to potencjał ukierunkowania działań na szlaki, takie jak p38 MAPK i immunoproteasom, w celu przełamania oporności na leki.

W warunkach hipoksji komórki MEC-1 wykazują przeprogramowanie metaboliczne, które wspiera ich przeżycie i proliferację. Adaptacja ta obejmuje zwiększoną ekspresję transporterów glukozy, takich jak GLUT1 i GLUT3, a także zmiany w glikolizie i produkcji mleczanu, które są regulowane przez czynniki indukowane hipoksją (HIF). Ponadto badania dotyczące delecji określonych mikroRNA, takich jak miR-155, za pomocą CRISPR/Cas9, ujawniły ich rolę w regulacji metabolizmu i proliferacji komórek MEC-1 w warunkach stresu hipoksycznego, otwierając tym samym nowe możliwości interwencji terapeutycznej.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym