Siirry sisältöön
MEC-1
Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
Krooninen lymfaattinen leukemia
Synonyymit
MEC1

Asiakirjat

MEC-1

Cell line · Tuotenumero 305434

The MEC-1 cell line is derived from a patient with chronic lymphocytic leukemia (CLL) in the prolymphocytoid transformation stage. It serves as a critical...

€420.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MEC-1-solulinja on peräisin potilaalta, jolla oli krooninen lymfosyyttileukemia (CLL) prolymfosyyttisen transformaation vaiheessa. Se toimii keskeisenä mallina B-solupahanlaatuisten kasvainten biologian tutkimuksessa, erityisesti CLL:n taustalla olevien molekyylimekanismien ja sen hoitovasteiden selvittämisessä. MEC-1-soluille on ominaista CD19- ja CD5-merkkiaineiden ilmentyminen, mikä on yhdenmukaista niiden CLL-alkuperän kanssa, ja niitä käytetään laajalti kemoresistenssin ja leukemian aineenvaihdunnan sopeutumismekanismien tutkimiseen.

MEC-1-soluja hyödyntävä tutkimus on tarjonnut tietoa kasvaimen mikroympäristön ja leukemiasolujen selviytymisen välisestä vuorovaikutuksesta. Esimerkiksi tämä solulinja on ollut keskeisessä roolissa tunnistettaessa resistenssimekanismeja kohdennettuihin hoitoihin, kuten Bcl-2-antagonisti venetoklaksiin. Resistentissä MEC-1-johdannaisissa (MEC-1 VER) on havaittu p38 MAPK:n yli-ilmentymistä sekä muutoksia apoptoosia edistävien ja estävien proteiinien ilmentymisessä. Tämä korostaa p38 MAPK:n ja immunoproteasomin kaltaisten signalointireittien kohdentamisen potentiaalia lääkeresistenssin voittamisessa.

Hypoksisissa olosuhteissa MEC-1-solut käyvät läpi metabolisen uudelleenohjelmoinnin, joka tukee niiden selviytymistä ja lisääntymistä. Tähän sopeutumiseen liittyy glukoosikuljettajien, kuten GLUT1:n ja GLUT3:n, ilmentymisen lisääntyminen sekä muutokset glykolyysissä ja laktaattituotannossa, joita säätelevät hypoksian indusoimat tekijät (HIF:t). Lisäksi tutkimukset, joissa on käytetty CRISPR/Cas9-tekniikkaa tiettyjen mikro-RNA:iden, kuten miR-155:n, poistamiseen, ovat paljastaneet niiden roolin MEC-1-solujen aineenvaihdunnan ja lisääntymisen säätelyssä hypoksisessa stressitilassa, mikä tarjoaa uusia mahdollisuuksia terapeuttisille toimenpiteille.

Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
Krooninen lymfaattinen leukemia
Synonyymit
  • MEC1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Lymfoblastien kaltaiset
Solutyyppi
B-solu

04Tunnisteet

Lähdeviite
MEC-1 (Cytionin tuotenumero 305434)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1870

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: TP53, p.Gln317Profs*20 (c.949dupC) (c.949_950insC), homotsygoottinen; Geenifuusio: R3HCC1L-HTRA1
Virukset
Muuntaja: Epstein-Barr-virus (EBV)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
IMDM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820800a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Kylvötiheys
3–5 × 10⁵/ml
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
61 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen