Gå til innholdet
MEC-1
Vev
Perifert blod
Sykdom
Kronisk lymfatisk leukemi
Synonymer
MEC1

Dokumenter

MEC-1

Cell line · Produktnummer 305434

The MEC-1 cell line is derived from a patient with chronic lymphocytic leukemia (CLL) in the prolymphocytoid transformation stage. It serves as a critical...

€420.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

MEC-1-cellelinjen stammer fra en pasient med kronisk lymfatisk leukemi (CLL) i det prolymfocytoide transformasjonsstadiet. Den fungerer som en viktig modell for å undersøke biologien bak B-celle-maligniteter, særlig de molekylære mekanismene som ligger til grunn for CLL og sykdommens respons på behandlinger. MEC-1-celler kjennetegnes ved uttrykk av CD19- og CD5-markører, noe som stemmer overens med deres opprinnelse i CLL, og de brukes mye til å studere mekanismene bak kjemoresistens og metabolske tilpasninger ved leukemi.

Forskning som benytter MEC-1-celler har gitt innsikt i samspillet mellom tumorens mikromiljø og leukemicellenes overlevelse. For eksempel har denne cellelinjen vært avgjørende for å identifisere mekanismer for resistens mot målrettede behandlinger, slik som Bcl-2-antagonisten venetoklaks. I resistente MEC-1-derivater (MEC-1 VER) har man observert overekspresjon av p38 MAPK og endringer i ekspresjonen av pro-apoptotiske og anti-apoptotiske proteiner. Dette understreker potensialet i å målrette behandlingen mot signalveier som p38 MAPK og immunoproteasomet for å overvinne medikamentresistens.

Under hypoksiske forhold viser MEC-1-celler en metabolsk omprogrammering som støtter deres overlevelse og proliferasjon. Denne tilpasningen innebærer økt uttrykk av glukosetransportører som GLUT1 og GLUT3, samt endringer i glykolyse og laktatproduksjon, som reguleres av hypoksiinduserbare faktorer (HIF-er). I tillegg har studier som involverer CRISPR/Cas9-mediert sletting av spesifikke mikroRNA-er, som miR-155, avdekket deres rolle i reguleringen av MEC-1-cellenes metabolisme og proliferasjon under hypoksisk stress, noe som åpner for ytterligere muligheter for terapeutisk intervensjon.

Vev
Perifert blod
Sykdom
Kronisk lymfatisk leukemi
Synonymer
  • MEC1

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Adhesjon og suspensjon
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblastlignende
Celletype
B-celle

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MEC-1 (Cytion-katalognummer 305434)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1870

05Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
Mutasjon: TP53, p.Gln317Profs*20 (c.949dupC) (c.949_950insC), homozygot; Genfusjon: R3HCC1L-HTRA1
Virus
Transformant: Epstein-Barr-virus (EBV)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
IMDM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820800a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Såtetthet
3–5 × 10⁵/ml
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
61 år
Etnisitet
Kaukasisk