İçeriğe atla
MEC-1
Doku
Periferik kan
Hastalık
Kronik lenfositik lösemi
Eş anlamlılar
MEC1

MEC-1

Cell line · Ürün numarası 305434

The MEC-1 cell line is derived from a patient with chronic lymphocytic leukemia (CLL) in the prolymphocytoid transformation stage. It serves as a critical...

€420.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

MEC-1 hücre hattı, prolimfositik transformasyon aşamasında olan bir kronik lenfositik lösemi (KLL) hastasından elde edilmiştir. Bu hücre hattı, B hücresi malignitelerinin biyolojisini, özellikle de KLL’nin temelini oluşturan moleküler mekanizmaları ve tedavilere verdiği yanıtları araştırmak için önemli bir model görevi görmektedir. MEC-1 hücreleri, CLL kökenleriyle tutarlı olarak CD19 ve CD5 belirteçlerinin ekspresyonu ile karakterize edilir ve lösemide kemoterapi direnci ve metabolik adaptasyon mekanizmalarını incelemek için yaygın olarak kullanılır.

MEC-1 hücrelerini kullanan araştırmalar, tümör mikroçevresi ile lösemi hücresi hayatta kalması arasındaki etkileşime ilişkin önemli bilgiler sağlamıştır. Örneğin, bu hücre hattı, Bcl-2 antagonisti venetoklaks gibi hedefe yönelik tedavilere karşı direnç mekanizmalarının tanımlanmasında önemli bir rol oynamıştır. Dirençli MEC-1 türevlerinde (MEC-1 VER), p38 MAPK'nın aşırı ekspresyonu ve pro-apoptotik ile anti-apoptotik protein ekspresyonunda değişiklikler gözlemlenmiştir. Bu durum, ilaç direncini aşmak için p38 MAPK ve immünoproteazom gibi yolakları hedeflemenin potansiyelini vurgulamaktadır.

Hipoksik koşullar altında, MEC-1 hücreleri hayatta kalmalarını ve çoğalmalarını destekleyen metabolik bir yeniden programlanma sergiler. Bu adaptasyon, GLUT1 ve GLUT3 gibi glikoz taşıyıcılarının ekspresyonunda artışın yanı sıra, hipoksiye duyarlı faktörler (HIF’ler) tarafından düzenlenen glikoliz ve laktat üretimindeki değişiklikleri de içerir. Ek olarak, miR-155 gibi belirli mikroRNA’ların CRISPR/Cas9 aracılı silinmesini içeren çalışmalar, bu mikroRNA’ların hipoksik stres altında MEC-1 hücrelerinin metabolizmasını ve çoğalmasını düzenlemedeki rolünü ortaya koymuş ve terapötik müdahale için yeni yollar sunmuştur.

Doku
Periferik kan
Hastalık
Kronik lenfositik lösemi
Eş anlamlılar
  • MEC1

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Yapışkan ve süspansiyon
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Lenfoblast benzeri
Hücre türü
B hücresi

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MEC-1 (Cytion katalog numarası 305434)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1870

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: TP53, p.Gln317Profs*20 (c.949dupC) (c.949_950insC), homozigot; Gen füzyonu: R3HCC1L-HTRA1
Virüsler
Transformant: Epstein-Barr virüsü (EBV)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
IMDM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM Sodyum piruvat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820800a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ekim yoğunluğu
3-5 × 10⁵/ml
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
61 yıl
Etnik köken
Kafkas