MEC-1

A linha celular MEC-1 é derivada de um doente com leucemia linfocítica crónica (LLC) na fase de transformação prolinfocitóide. Constitui um modelo fundamental para a investigação da biologia das neoplasias das células B, em particular dos mecanismos moleculares subjacentes à LLC e às suas respostas às terapias. As células MEC-1 caracterizam-se pela expressão dos marcadores CD19 e CD5, o que é consistente com a sua origem na LLC, e são amplamente utilizadas para estudar os mecanismos de quimiorresistência e as adaptações metabólicas na leucemia.

A investigação que utiliza células MEC-1 tem proporcionado novos conhecimentos sobre a interação entre o microambiente tumoral e a sobrevivência das células leucémicas. Por exemplo, esta linha celular tem sido fundamental na identificação de mecanismos de resistência a terapias direcionadas, como o antagonista de Bcl-2 venetoclax. Em derivados resistentes das células MEC-1 (MEC-1 VER), observou-se a sobreexpressão da p38 MAPK e alterações na expressão de proteínas pró-apoptóticas e antiapoptóticas. Isto destaca o potencial de se visar vias como a p38 MAPK e o imunoproteassoma para superar a resistência aos fármacos.

Em condições hipóxicas, as células MEC-1 apresentam uma reprogramação metabólica que favorece a sua sobrevivência e proliferação. Esta adaptação envolve um aumento da expressão de transportadores de glicose, como o GLUT1 e o GLUT3, bem como alterações na glicólise e na produção de lactato, que são reguladas por fatores induzíveis pela hipóxia (HIFs). Além disso, estudos que envolveram a deleção mediada por CRISPR/Cas9 de microARN específicos, como o miR-155, revelaram o seu papel na regulação do metabolismo e da proliferação das células MEC-1 sob stress hipóxico, proporcionando novas vias para a intervenção terapêutica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia