MEC-1

A linhagem celular MEC-1 é derivada de um paciente com leucemia linfocítica crônica (LLC) no estágio de transformação prolinfocitóide. Ela serve como um modelo essencial para a investigação da biologia das neoplasias de células B, particularmente dos mecanismos moleculares subjacentes à LLC e suas respostas às terapias. As células MEC-1 são caracterizadas pela expressão dos marcadores CD19 e CD5, o que é consistente com sua origem na LLC, e são amplamente utilizadas para estudar os mecanismos de quimiorresistência e adaptações metabólicas na leucemia.

Pesquisas utilizando células MEC-1 proporcionaram insights sobre a interação entre o microambiente tumoral e a sobrevivência das células leucêmicas. Por exemplo, essa linhagem celular tem sido fundamental para identificar mecanismos de resistência a terapias direcionadas, como o venetoclax, um antagonista de Bcl-2. Em derivadas resistentes da MEC-1 (MEC-1 VER), foram observadas a superexpressão da p38 MAPK e alterações na expressão de proteínas pró-apoptóticas e antiapoptóticas. Isso destaca o potencial de se direcionar vias como a p38 MAPK e o imunoproteassoma para superar a resistência aos medicamentos.

Em condições hipóxicas, as células MEC-1 exibem uma reprogramação metabólica que sustenta sua sobrevivência e proliferação. Essa adaptação envolve o aumento da expressão de transportadores de glicose, como GLUT1 e GLUT3, bem como mudanças na glicólise e na produção de lactato, que são reguladas por fatores induzíveis pela hipóxia (HIFs). Além disso, estudos envolvendo a deleção mediada por CRISPR/Cas9 de microRNAs específicos, como o miR-155, revelaram seu papel na regulação do metabolismo e da proliferação das células MEC-1 sob estresse hipóxico, proporcionando novas vias para intervenção terapêutica.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.