MEC-1

La linea cellulare MEC-1 deriva da un paziente affetto da leucemia linfocitica cronica (CLL) in fase di trasformazione prolinfocitoide. Essa costituisce un modello fondamentale per lo studio della biologia delle neoplasie a cellule B, in particolare dei meccanismi molecolari alla base della CLL e delle sue risposte alle terapie. Le cellule MEC-1 sono caratterizzate dall’espressione dei marcatori CD19 e CD5, in linea con la loro origine nella CLL, e sono ampiamente utilizzate per studiare i meccanismi di chemioresistenza e gli adattamenti metabolici nella leucemia.

La ricerca che utilizza le cellule MEC-1 ha fornito approfondimenti sull’interazione tra il microambiente tumorale e la sopravvivenza delle cellule leucemiche. Ad esempio, questa linea cellulare è stata determinante nell’identificazione dei meccanismi di resistenza alle terapie mirate, come l’antagonista di Bcl-2 venetoclax. Nei derivati resistenti delle cellule MEC-1 (MEC-1 VER) sono state osservate la sovraespressione della p38 MAPK e alterazioni nell’espressione delle proteine pro-apoptotiche e anti-apoptotiche. Ciò evidenzia il potenziale di intervenire su vie come la p38 MAPK e l’immunoproteasoma per superare la resistenza ai farmaci.

In condizioni di ipossia, le cellule MEC-1 mostrano una riprogrammazione metabolica che ne favorisce la sopravvivenza e la proliferazione. Questo adattamento comporta un aumento dell’espressione di trasportatori del glucosio come GLUT1 e GLUT3, nonché cambiamenti nella glicolisi e nella produzione di lattato, regolati dai fattori inducibili dall’ipossia (HIF). Inoltre, studi che prevedono la delezione mediata da CRISPR/Cas9 di specifici microRNA, come miR-155, hanno rivelato il loro ruolo nella regolazione del metabolismo e della proliferazione delle cellule MEC-1 in condizioni di stress ipossico, aprendo ulteriori vie per l’intervento terapeutico.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia