MEC-1

La lignée cellulaire MEC-1 provient d’un patient atteint de leucémie lymphoïde chronique (LLC) au stade de transformation prolymphocytoïde. Elle constitue un modèle essentiel pour l’étude de la biologie des tumeurs malignes à cellules B, en particulier des mécanismes moléculaires sous-jacents à la LLC et de ses réponses aux traitements. Les cellules MEC-1 se caractérisent par l’expression des marqueurs CD19 et CD5, ce qui correspond à leur origine dans la LLC, et elles sont largement utilisées pour étudier les mécanismes de chimiorésistance et les adaptations métaboliques dans la leucémie.

Les recherches menées à l’aide des cellules MEC-1 ont permis de mieux comprendre l’interaction entre le microenvironnement tumoral et la survie des cellules leucémiques. Par exemple, cette lignée cellulaire a joué un rôle déterminant dans l’identification des mécanismes de résistance aux thérapies ciblées, comme le vénétoclax, un antagoniste de Bcl-2. Dans les dérivés résistants de la lignée MEC-1 (MEC-1 VER), on a observé une surexpression de la p38 MAPK ainsi que des altérations dans l’expression des protéines pro-apoptotiques et anti-apoptotiques. Cela met en évidence le potentiel de cibler des voies telles que la p38 MAPK et l’immunoprotéasome pour surmonter la résistance aux médicaments.

Dans des conditions hypoxiques, les cellules MEC-1 présentent une reprogrammation métabolique qui favorise leur survie et leur prolifération. Cette adaptation implique une expression accrue de transporteurs de glucose comme GLUT1 et GLUT3, ainsi que des changements dans la glycolyse et la production de lactate, qui sont régulés par les facteurs inductibles par l’hypoxie (HIF). De plus, des études portant sur la suppression, par CRISPR/Cas9, de microARN spécifiques, tels que le miR-155, ont révélé leur rôle dans la régulation du métabolisme et de la prolifération des cellules MEC-1 en situation de stress hypoxique, ouvrant ainsi de nouvelles voies d’intervention thérapeutique.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.