Ga naar de inhoud
MEC-1
Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Chronische lymfatische leukemie
Synoniemen
MEC1

Documenten

MEC-1

Cell line · Productnummer 305434

The MEC-1 cell line is derived from a patient with chronic lymphocytic leukemia (CLL) in the prolymphocytoid transformation stage. It serves as a critical...

€420.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De MEC-1-cellijn is afkomstig van een patiënt met chronische lymfatische leukemie (CLL) in het prolymfocytoïde transformatiestadium. Deze cellijn fungeert als een cruciaal model voor onderzoek naar de biologie van B-celmaligniteiten, met name de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan CLL en de reacties van deze aandoening op behandelingen. MEC-1-cellen worden gekenmerkt door de expressie van de CD19- en CD5-markers, wat overeenkomt met hun oorsprong in CLL, en ze worden op grote schaal gebruikt om de mechanismen van chemoresistentie en metabolische aanpassingen bij leukemie te bestuderen.

Onderzoek met behulp van MEC-1-cellen heeft inzicht verschaft in de wisselwerking tussen de tumor-micro-omgeving en de overleving van leukemiecellen. Deze cellijn heeft bijvoorbeeld een cruciale rol gespeeld bij het identificeren van mechanismen van resistentie tegen gerichte therapieën, zoals de Bcl-2-antagonist venetoclax. In resistente MEC-1-derivaten (MEC-1 VER) zijn overexpressie van p38 MAPK en veranderingen in de expressie van pro-apoptotische en anti-apoptotische eiwitten waargenomen. Dit onderstreept het potentieel van het richten op signaalwegen zoals p38 MAPK en het immunoproteasoom om geneesmiddelresistentie te overwinnen.

Onder hypoxische omstandigheden vertonen MEC-1-cellen een metabolische herprogrammering die hun overleving en proliferatie ondersteunt. Deze aanpassing omvat een verhoogde expressie van glucosetransporters zoals GLUT1 en GLUT3, evenals verschuivingen in de glycolyse en lactaatproductie, die worden gereguleerd door hypoxie-induceerbare factoren (HIF’s). Bovendien hebben studies waarbij met behulp van CRISPR/Cas9 specifieke microRNA’s, zoals miR-155, werden verwijderd, de rol daarvan aan het licht gebracht bij de regulering van het metabolisme en de proliferatie van MEC-1-cellen onder hypoxische stress, wat verdere mogelijkheden biedt voor therapeutische interventie.

Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Chronische lymfatische leukemie
Synoniemen
  • MEC1

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Adhesie en suspensie
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Lymfoblast-achtig
Celtype
B cel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MEC-1 (Cytion-catalogusnummer 305434)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1870

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: TP53, p.Gln317Profs*20 (c.949dupC) (c.949_950insC), homozygoot; Genfusie: R3HCC1L-HTRA1
Virussen
Transformant: Epstein-Barr virus (EBV)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
IMDM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820800a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Zaaidichtheid
3-5 × 10⁵/ml
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
61 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch