HTR-8/SVneo ląstelės - taip pat žinoma kaip HTR-8/SV neo, HTR-8/SV-neo, HTR8/SVneo ir HTR8svn – tai plačiai naudojama žmogaus trofoblastų ląstelių linija, kurią 1993 m. sukūrė Graham ir kt. [1]. Ši ląstelių linija buvo sukurta įterpiant beždžionių viruso 40 didįjį T antigeną į pirmojo trimestro žmogaus trofoblastus, dėl ko ląstelės įgijo ilgesnį gyvavimo laiką, gerokai viršijantį 12–14 pasėlių skaičių, būdingą pirminės HTR-8 linijos ląstelėms. Nuo pat sukūrimo HTR-8/SVneo ląstelės tapo nepakeičiamu in vitro modeliu placentos trofoblastų biologijai tirti, įskaitant ląstelių invaziją, migraciją ir proliferaciją. Mokslininkai visame pasaulyje remiasi šia linija, tyrinėdami nėštumo sutrikimus, tokius kaip preeklampsija, gestacinis cukrinis diabetas ir pasikartojantys savaiminiai abortai, taip pat nagrinėdami aplinkos toksinų ir farmakologinių medžiagų poveikį trofoblastų funkcijai.

Svarbiausi dalykai

• HTR-8/SVneo – tai SV40 virusu imortalizuota žmogaus trofoblastų linija, gauta iš pirmojo nėštumo trimestro placentos audinio (Cellosaurus registracijos numeris: CVCL_7162).
• Šioje ląstelių linijoje yra mišri epitelinių trofoblastų tipo ir mezenchiminių/stromos tipo ląstelių populiacija, todėl ji tampa epitelio-mezenchiminio perėjimo (EMT) tyrimų modeliu [2].
• HTR-8/SVneo ląstelės plačiai naudojamos preeklampsijos, nėštumo cukrinio diabeto, pasikartojančių savaiminių persileidimų ir nėštumo intrahepatinės cholestazės tyrimams.
• Ši ląstelių linija pasižymi beveik triploidiniu kariotipu su klonų vidiniu kintamumu – tai yra bruožas, būdingas ilgą laiką kultivuojamoms trofoblastinėms ląstelių linijoms [3].
• HTR-8/SVneo ląstelės priklauso ENCODE projekto bendrųjų ląstelių tipų grupei (3 lygis) ir turi prieinamus DNR metilinimo omikos duomenis.
• Buvo sukurtos dešimtys išvestinių „knockout“ ir reporterinių linijų, o tai rodo šios tėvinės ląstelių linijos plačias taikymo galimybes funkcinėje genomikoje.

Kas yra HTR-8/SVneo?

HTR-8/SVneo linija buvo sukurta iš pirmojo trimestro žmogaus placentos trofoblastų, gautų iš donoro, kurio lytis nenurodyta, 6–12 savaičių nėštumo amžiaus. Donorei nebuvo užregistruota jokių susijusių motinos ligų. Ląstelės buvo imortalizuotos transfekuojant beždžionių viruso 40 didžiojo T antigeno genu, taip sukuriant transformuotą ląstelių liniją (CVCL_7162) su neribotu proliferacijos pajėgumu. [1]. Buvo patvirtinta, kad tiek pradinė HTR-8 linija, tiek iš jos gauta HTR-8/SVneo linija yra citokeratino teigiamos, o tai patvirtina jų epitelinio trofoblasto pobūdį. Transfekuota linija išskiria tik žmogaus chorioninį gonadotropiną – šios savybės nebuvo pastebėta pradinėse ląstelėse.

Vėlesnis tyrimas parodė, kad HTR-8/SVneo nėra homogeniška trofoblastų populiacija. Abou-Kheir ir kolegos įrodė, kad ši linija apima dvi skirtingas ląstelių populiacijas: vieną, turinčią epitelinių trofoblastų savybių, ir kitą, pasižyminčią mezenchiminėmis arba stromos savybėmis [2]. Ši mišri populiacija turi įtakos eksperimentinių rezultatų interpretavimui, ypač atliekant invazijos ir migracijos tyrimus. Citogenominė analizė taip pat parodė, kad HTR-8/SVneo turi beveik triploidinį kariotipą su tarpkloninėmis ir intrakloninėmis chromosomų aberacijomis, atsirandančiomis dėl ilgalaikio kultivavimo [3]. Molekulinis profiliavimas patvirtino, kad HTR-8/SVneo turi keletą, tačiau ne visus, žymeklius, būdingus pirminėms ekstravilių trofoblastų subpopuliacijoms [4].

HTR-8/SVneo — Informacija apie kultūrą

HTR-8/SVneo elementų privalumai

HTR-8/SVneo ląstelės siūlo keletą įtikinamų privalumų placentos ir reprodukcijos tyrimams. SV40 virusu pasiekta nemirtingumas užtikrina šiai ląstelių linijai stabilų ir ilgesnį gyvavimo laiką, kuris gerokai viršija 12–14 pasėlių skaičių, pasiekiamą naudojant pirmines HTR-8 ląsteles [1]. Šis ilgaamžiškumas leidžia atlikti didelio masto, pakartojamus eksperimentus, išvengiant logistinių sunkumų, susijusių su šviežių pirminių trofoblastų įsigijimu. Ląstelės išlaiko pagrindinius trofoblastų žymenis – įskaitant citocheratino ekspresiją ir žmogaus chorioninio gonadotropino sekreciją – taip sudarant biologiškai reikšmingą kontekstą placentos funkcijos mechanizmų tyrimams.

Šios linijos gebėjimas reaguoti į įvairius eksperimentinius poveikius ją daro ypač universalią. Tyrėjai, nagrinėdami įvairius mokslinius klausimus, sėkmingai taikė RNR interferenciją, plazmidų perprodukciją, CRISPR-Cas9 genų išjungimą ir farmakologinį gydymą HTR-8/SVneo ląstelėms. [5] [6]. Ląstelės numatoma tvarka reaguoja į hipoksines sąlygas, aplinką, kurioje vyrauja aukštas gliukozės lygis, ir citokinų stimuliaciją, tiksliai atkartodamos tam tikrus patologinių būklių, įskaitant preeklampsiją ir nėštumo cukrinį diabetą, aspektus [7] [8]. Be to, vis didėjantis išvestinių „knockout“ linijų rinkinys leidžia vykdyti tikslinę funkcinę genomiką, nereikalaujant iš naujo kurti tėvinės linijos nuo nulio.

HTR-8/SVneo ląstelių apribojimai

Svarbiausias HTR-8/SVneo trūkumas yra mišri ląstelių populiacija. Charakterizavimo tyrimai patvirtino, kad toje pačioje kultūroje kartu egzistuoja epitelinės trofoblastų tipo ir mezenchiminės stromos tipo ląstelės [2]. Dėl šio nevienalytiškumo eksperimentinius stebėjimus sunku priskirti vienam konkrečiam ląstelių tipui. Rezultatai, gauti tiriant bendrą populiaciją, gali užgožti konkrečioms subpopuliacijoms būdingas reakcijas, todėl ekstrapoliuojant išvadas į gryną pirminių trofoblastų elgseną reikia elgtis atsargiai.

HTR-8/SVneo beveik triploidinis ir aneuploidinis kariotipas kelia dar vieną abejonę [3]. Chromosomų nestabilumas, kuris gali didėti didėjant pasėlių skaičiui, gali pakeisti genų dozę ir dėl to paveikti signalinių kelių veikimą. Be to, nors HTR-8/SVneo ląstelės turi daug bendrų molekulinių žymenų su pirminiais ekstraviliiniais trofoblastais, jos nevisiškai atkuria visų pirminių trofoblastų subpopuliacijų savybių [4]. Todėl tyrėjai, kai tik įmanoma, turėtų papildyti HTR-8/SVneo duomenis pirminių ląstelių patikrinimu arba in vivo modeliais, ypač atliekant tyrimus, susijusius su diferenciacija ar endokrininėmis funkcijomis.

HTR-8/SVneo ląstelių pritaikymo sritys

Preeklampsijos tyrimai

Preeklampsija (PE) yra vienas iš intensyviausiai tiriamų nėštumo sutrikimų, naudojant HTR-8/SVneo ląsteles. Ši ląstelių linija tarnauja kaip patogus in vitro modelis hipoksijos sukeltam trofoblastų disfunkcijai tirti, kuri yra pagrindinis PE patogenezės bruožas. Fan ir kolegos, naudodami hipoksinėmis sąlygomis kultivuotas HTR-8/SVneo ląsteles, įrodė, kad estrogeno receptorius α (ERα) transkripciniu būdu aktyvuoja ACSL4, skatindamas ferroptozę – geležies priklausomą ląstelių mirtį – placentos trofoblastuose. [9]. Slopinus ERα, sumažėjo oksidacinio streso žymenų lygis ir atsigavo ląstelių gyvybingumas, o tai leido nustatyti naują terapinę kryptį.

Naudojant šį modelį taip pat buvo išaiškinti epigenetiniai ir transkripciniai mechanizmai, susiję su PE. Zhao ir kolegos parodė, kad SETD7 mediatoriu vykdoma H3K4me3 modifikacija LncRNA XIST promotoriuje skatina trofoblastų piroptozę per FOXA1/TMBIM4/GSDMD-N ašį hipoksijos ir reoksigenacijos sąlygomis apdorotose HTR-8/SVneo ląstelėse [7]. Be to, Zhu ir kolegos nustatė, kad PTPRN2 — kurio ekspresija padidėja hipoksinėse HTR-8/SVneo ląstelėse — slopina trofoblastų invaziją, stabdydamas Wnt/β-katenino signalinį kelią, taip susiedamas nenormalų tirozino fosfatazės signalizavimą su paviršine placentacija, pasireiškiančia preeklampsijos atveju [10]. Wangas ir kolegos taip pat įrodė, kad transkripcijos faktorius IRF1 per HDAC1 reguliuoja PANoptozę hipoksinėse HTR-8/SVneo ląstelėse, suteikdami įžvalgų apie daugialypius ląstelių mirties kelius, veikiančius PE atveju [11].

CCN5 (WISP-2) pasirodė esąs dar vienas trofoblastų elgesio reguliatorius, susijęs su preeklampsija. Gongas ir kolegos pranešė, kad CCN5 perprodukcija HTR-8/SVneo ląstelėse žymiai slopino proliferaciją, migraciją, invaziją ir epitelio-mezenchiminį perėjimą, o CCN5 ekspresijos slopinimas turėjo priešingą poveikį [12]. Chengas ir kolegos taip pat įrodė, kad TGFβ1 slopina HTR-8/SVneo ląstelių migraciją, invaziją ir proliferaciją per audinių transglutaminazės tarpininkaujamą TLR4/NF-κB signalo kelio aktyvaciją, taip nustatydami mechanistinį ryšį tarp placentos fibrozės ir trofoblastų disfunkcijos esant preeklampsijai [13].

Nėštumo cukrinis diabetas ir trofoblastų disfunkcija

Nėštumo cukrinis diabetas (GDM) sukuria hiperglikeminę placentos mikroaplinką, kuri sutrikdo trofoblastų funkciją. HTR-8/SVneo ląstelės, veiktos didelėmis gliukozės koncentracijomis, atkuria pagrindinius su GDM susijusio trofoblastų pažeidimo aspektus. Lin ir kolegos pasinaudojo šiuo modeliu, kad ištirtų placentos ferroptozę GDM atveju, analizuodami ultrastruktūrą, reaktyviųjų deguonies rūšių susidarymą ir geležies kaupimąsi. Jie nustatė, kad metforminas silpnino ferroptozės žymenis tiek HTR-8/SVneo ląstelėse, tiek placentos mėginiuose, paimtuose iš GDM sergančių pacientų, o tai rodo, kad šis antidiabetinis vaistas turi apsauginį mechanizmą. [14].

Zhangas ir kolegos nustatė, kad neurotrofinas-4 (NTF4) yra su GDM susijęs veiksnys, kurio ekspresija padidėja sergančių pacientų placentos audinyje. HTR-8/SVneo ląstelėse, veiktose dideliu gliukozės kiekiu, NTF4 slopinimas sumažino apoptozę ir uždegiminių citokinų sekreciją, tuo pačiu atkuriant proliferacijos gebėjimą. Šie poveikiai buvo tarpininkaujami per PI3K/AKT signalizacijos kelią, o tai rodo, kad NTF4 gali būti potencialus terapinis taikinys GDM susijusios placentos disfunkcijos atveju. [8]. Be to, Yu ir kolegos parodė, kad serumo miR-320a koncentracija yra padidėjusi pacientėms, sergančioms gestaciniu diabetu (GDM), ir kad šis mikroRNR tiesiogiai veikia pagrindinį reguliuojantį geną HTR-8/SVneo ląstelėse, slopindamas jų proliferaciją ir skatindamas apoptozę. Šis mikroRNR taip pat turėjo prognostinę reikšmę vaisiaus makrosomijos atžvilgiu, susiedamas molekulinius pokyčius trofoblastų lygmenyje su nepalankiais naujagimių rezultatais [15].

Pasikartojantys savaiminiai persileidimai ir nėštumo praradimai

HTR-8/SVneo ląstelės yra vertinga priemonė pasikartojančio savaiminio aborto (RSA) ir su juo susijusios trofoblastų disfunkcijos tyrimams. Huangas ir kolegos, naudodami erastiną, HTR-8/SVneo ląstelėse sukėlė ferroptozę, siekdami imituoti su RSA susijusį trofoblastų pažeidimą. Jie nustatė, kad tradicinės kinų medicinos preparatas „Anzi Tiaochong Tang“ slopino ferroptozę per METTL14/m6A/SLC39A14 ašį, mažindamas geležies kaupimąsi ir oksidacinį stresą. Šis tyrimas parodė, kaip m6A RNR metilinimas koordinuoja geležies metabolizmą trofoblastuose, ir nustatė potencialią RSA gydymo strategiją. [16].

N6-metiladenozino (m6A) epitranskriptominio perprogramavimo vaidmenį trofoblastų gyvybingumui toliau tyrinėjo Ye ir Deng, kurie parodė, kad METTL14 skatina trofoblastų disfunkciją, m6A priklausomu būdu stiprindamas SZRD1 ekspresiją HTR-8/SVneo ląstelėse. Padidėjęs SZRD1 kiekis sutrikdė proliferaciją, migraciją, invaziją ir angiogenezę, atspindėdamas seklią trofoblastų invaziją, būdingą preeklampsijai ir ankstyvam nėštumo nutraukimui. [17]. Šie tyrimai kartu parodo, kad HTR-8/SVneo ląstelės yra veiksminga platforma, leidžianti išnagrinėti epitranskriptominį reguliavimą reprodukcinės patologijos srityje.

Trofoblastų invaziją taip pat reguliuoja mikroRNR, aktyvios ankstyvojo placentos formavimosi metu. Arora ir kolegos, naudodami HTR-8/SVneo ląsteles, parodė, kad miR-22-3p veikia Sp1, taip sumažindamas cistationino β-sintazės ekspresiją ir slopindamas MMP-2 bei MMP-9 aktyvumą. Ši reakcijų grandinė riboja trofoblastų invazinius gebėjimus ir gali prisidėti prie placentos formavimosi sutrikimų, kurie yra ankstyvosios preeklampsijos ir kitų nepalankių pasekmių priežastis. [18].

Aplinkos toksikologija ir reprodukcinis saugumas

HTR-8/SVneo ląstelės pasirodė esą labai tinkamos aplinkos teršalų ir farmakologinių medžiagų reprodukcinio toksiškumo vertinimui. Zhang ir kolegos tyrė padangų antioksidantą 6PPD ir įrodė, kad didelės dozės poveikis sukėlė HTR-8/SVneo ląstelių senėjimą, slopindamas BAZ1B reguliuojamą p21 ubikvitinavimą ir skilimą. Ši senėjimo programa sutrikdė trofoblastų funkciją ir klinikinėje atvejų-kontrolės studijoje buvo susieta su nepaaiškinamu persileidimu, taip nustatant mechanistinį ryšį tarp iš padangų kylančios taršos ir nėštumo praradimo. [19].

Farmakologinio saugumo klausimus nagrinėjo Liu ir kolegos, kurie, naudodami HTR-8/SVneo ląsteles, atskleidė triptolido sukeliamo reprodukcinio toksiškumo mechanizmą. Integruotos MeRIP-seq ir mRNA-seq analizės parodė, kad triptolidas – aktyvusis „Tripterygium wilfordii“ komponentas – iš esmės perprogramavo m6A epitranskriptomą, pakeisdamas daugiau nei 1 700 genų ekspresiją ir sukeldamas trofoblastų ląstelių pažeidimus. [6]. Hu ir kolegos taip pat įrodė, kad glutationo išeikvojimas HTR-8/SVneo ląstelėse padidina reaktyviųjų deguonies rūšių kiekį, sukelia DNR pažeidimus ir aktyvuoja cGAS-STING uždegiminį kelią – mechanizmą, susijusį su oksidaciniu placentos pažeidimu, kurį sukelia aplinkos veiksniai [5].

Tyrimai, susiję su nėštumo metu pasireiškiančiomis kepenų ligomis, dar kartą patvirtina HTR-8/SVneo ląstelių universalumą. Xu ir kolegos, naudodami šią ląstelių liniją kartu su erdvinės metabolomikos metodais, tyrė, kaip tulžies rūgščių kaupimasis nėštumo metu pasireiškiančioje intrahepatinėje cholestazėje (ICP) skatina trofoblastų apoptozę per glicerofosfolipidų metabolizmo perprogramavimą [20]. Liu ir kolegos atskirai patvirtino tradicinės kinų medicinos preparato „Yinzhihuang“ geriamojo skysčio apsauginį poveikį taurocholio rūgšties sukeltose HTR-8/SVneo ląstelėse, įrodydami jo gebėjimą atkurti trofoblastų gyvybingumą esant cholestazės sąlygoms [21].

Išvada

HTR-8/SVneo ląstelės tebėra vienas iš produktyviausių ir plačiausiai naudojamų žmogaus trofoblastų modelių reprodukcinėje biologijoje. Nuo preeklampsijos, nėštumo cukrinio diabeto ir savaiminio aborto mechanizmų išaiškinimo iki aplinkos teršalų ir farmakologinių medžiagų keliamos reprodukcinės rizikos vertinimo – ši ląstelių linija įrodė nepaprastą naudingumą įvairiuose mokslinių tyrimų kontekstuose. Jos jautrumas hipoksijai, hiperglikemijai ir epigenetiniams pokyčiams – kartu su vis didėjančiu išvestinių „knockout“ linijų pasirinkimu – užtikrina, kad HTR-8/SVneo ląstelės ir toliau suteiks esminių įžvalgų apie placentos fiziologiją ir patologiją. Mokslininkams, ieškantiems gerai apibūdinto, biologiškai reikšmingo trofoblastų modelio, HTR-8/SVneo ląstelės taps nepakeičiamu įrankiu. Norėdami įsigyti HTR-8/SVneo ląsteles arba pateikti užklausą, apsilankykite cytion.com.

Svarbiausi leidiniai

1. Graham CH, Hawley TS, Hawley RG, MacDougall JR, Kerbel RS, Khoo N, Lala PK (1993) Ilgesnį gyvavimo laiką turinčių pirmojo trimestro žmogaus trofoblastų ląstelių išskyrimas ir charakterizavimas. „Experimental Cell Research“. PMID: 7684692
2. Abou-Kheir W, Barrak J, Hadadeh O, Daoud G (2017) HTR-8/SVneo ląstelių linija susideda iš mišrios ląstelių populiacijos. „Placenta“. PMID: 28161053
3. Weber M, Weise A, Vasheghani F (2021) Šešių žmogaus trofoblastinių ląstelių linijų citogenomika. „Placenta“. PMID: 33096371
4. Pastuschek J, Nonn O, Gutiérrez-Samudio RN (2021) Nustatytų iš trofoblastų išskirtų ląstelių linijų molekulinės savybės. „Placenta“. PMID: 33810901
5. Hu S, Liu W, Dong Y (2026) Glutationo išeikvojimas aktyvuoja cGAS-STING signalizacijos kelią per oksidacinį stresą preeklampsijos atveju. „Molekulinė imunologija“. PMID: 42068604
6. Liu X, Wu Y, Tian J (2026) m(6)A epitranskriptomo perprogramavimas lemia triptolido sukeltą reprodukcinį toksiškumą HTR-8/SVneo ląstelėse. „Toxics“. PMID: 42043161
7. Zhao X, Li L, Wang Y (2026) SETD7 reguliuojamas LncRNA XIST epigenetinis reguliavimas skatina trofoblastų piroptozę: tyrimas, atliktas naudojant preeklampsijos pelių ir ląstelių modelius. „Biology Direct“. PMID: 42177518
8. Zhang L, Yang J (2026) NTF4 slopinimas per PI3K/AKT signalinį kelią sumažina aukšto gliukozės lygio sukeltą apoptozę ir uždegimą HTR-8/SVneo ląstelėse. Imunitetas, uždegimas ir ligos. PMID: 42036822
9. Fan X, Yang Y, Zhu X (2026) ERα skatina hipoksijos sukeltą ferroptozę placentos trofoblastuose, transkripciškai aktyvuodamas ACSL4. „American Journal of Reproductive Immunology“. PMID: 42160036
10. Zhu T, Zeng WJ, Zhang Y (2026) Hipoksijos sukeltas PTPRN2 slopina trofoblastų invaziją, slopindamas Wnt/β-katenino signalinį kelią. „Current medical science“. PMID: 42154150
11. Wang Z, Cheng L, Li G (2026) Transkripcijos faktorius IRF1 moduliuoja HDAC1 ir PANoptosis, taip reguliuodamas preeklampsijos progresavimą. „Biology Direct“. PMID: 42035194
12. Gong Y, Li J, Wang C (2026) CCN5 perprodukcija slopina trofoblastų HTR-8/SVneo ląstelių proliferaciją, migraciją, invaziją ir epitelio-mezenchiminį perėjimą. „European Journal of Pharmacology“. PMID: 42178008
13. Cheng M, Di X, Chen Q (2026) TGFβ1 slopina HTR-8/Svneo ląstelių migraciją, invaziją ir proliferaciją per tTG aktyvuotą TLR4/NF-κB signalizacijos kelią. „Journal of biochemical and molecular toxicology“. PMID: 42008735
14. Lin Q, Qin X, Shen M (2026) Metforminas ir placentos ferroptozė nėštumo cukriniu diabetu: mechanizmo tyrimas. „Journal of diabetes research“. PMID: 42237524
15. Yu R, Liu X, Zhang S (2026) miR‑320a nustatymas serume nėščiųjų cukrinio diabeto atveju makrosomijos prognozavimui ir mechanizmo tyrimas in vitro. „BMC Medical Genomics“. PMID: 42210203
16. Huang S, Yu M, Luo Y (2026) „Anzi Tiaochong Tang“ slopina trofoblastų ferroptozę per METTL14/m6A/SLC39A14 ašį pasikartojančių savaiminių persileidimų atveju. „Frontiers in pharmacology“. PMID: 42137328
17. Ye Q, Deng L (2026) METTL14 skatina trofoblastų disfunkciją, m6A priklausomu būdu didindamas SZRD1 ekspresiją. „Human Cell“. PMID: 42133253
18. Arora P, Kalra S, Dhingra R (2025) MikroRNR-22 (miR-22) reguliuoja trofoblastų ląstelių invaziją per specifiškumo baltymo 1 (Sp1)/cistationino β-sintazės (CBS)/matricos metaloproteinazių 2 ir 9 (MMP-2 ir MMP-9) signalinį kelią. „Cureus“. PMID: 41583211
19. Zhang W, Liang Y, Sun Y (2026) Didelės padangų antioksidanto 6PPD dozės poveikis sukelia senėjimą, kuris, slopindamas BAZ1B reguliuojamą P21 ubikvitinacijos skilimą, sukelia nepaaiškinamą persileidimą. „EBioMedicine“. PMID: 42224779
20. Xu ZT, Ge LX, Luo L (2026) PIP(2) kaupimasis spongiotrofoblaste skatina trofoblasto apoptozę nėštumo metu pasireiškiančio intrahepatinio cholestazės atveju. „Molecular reproduction and development“. PMID: 42017405
21. Liu T, Zhuang X, Gu W (2025) „Yinzhihuang“ geriamasis tirpalas palengvina nėštumo metu pasireiškiančią intrahepatinę cholestazę: integruota bioinformatinė ir eksperimentinė mechanizmo analizė. Motinos ir vaisiaus medicina. PMID: 41608209