Células HTR-8/SVneo - também conhecidas como HTR-8/SV neo, HTR-8/SV-neo, HTR8/SVneo e HTR8svn - são uma linha celular de trofoblastos humanos amplamente utilizada, estabelecida por Graham et al. em 1993 [1]. A linha foi criada através da introdução do antígeno T grande do vírus simiano 40 em trofoblastos humanos do primeiro trimestre, conferindo às células uma esperança de vida prolongada, muito além das 12 a 14 passagens típicas da linha parental HTR-8. Desde a sua criação, as células HTR-8/SVneo tornaram-se um modelo in vitro indispensável para o estudo da biologia dos trofoblastos placentários, incluindo a invasão, a migração e a proliferação celular. Investigadores de todo o mundo recorrem a esta linha para investigar distúrbios da gravidez, tais como a pré-eclâmpsia, a diabetes mellitus gestacional e o aborto espontâneo recorrente, bem como para explorar os efeitos de substâncias tóxicas ambientais e de agentes farmacológicos na função dos trofoblastos.

Pontos-chave

• A HTR-8/SVneo é uma linha de trofoblastos humanos imortalizados com SV40, derivada de tecido placentário do primeiro trimestre (número de acesso no Cellosaurus: CVCL_7162).
• Esta linha celular contém uma população mista de células epiteliais do tipo trofoblasto e células mesenquimais/estromais, o que a torna um modelo para estudos sobre a transição epitelial-mesenquimal (EMT) [2].
• As células HTR-8/SVneo são amplamente utilizadas para estudar a pré-eclâmpsia, a diabetes mellitus gestacional, o aborto espontâneo recorrente e a colestase intra-hepática da gravidez.
• Esta linha apresenta um cariótipo quase triploide com variabilidade intraclonal, uma característica comum às linhas celulares trofoblásticas cultivadas a longo prazo [3].
• As células HTR-8/SVneo fazem parte dos tipos celulares comuns do projeto ENCODE (nível 3) e dispõem de dados ómicos de metilação do ADN.
• Foram geradas dezenas de linhas derivadas de knockout e de repórter, o que reflete a ampla utilidade desta linha celular parental na genómica funcional.

O que é o HTR-8/SVneo?

A linha celular HTR-8/SVneo foi estabelecida a partir de trofoblastos placentários humanos do primeiro trimestre, obtidos de uma dadora de sexo não especificado, com uma idade gestacional de 6 a 12 semanas. Não foi registada qualquer doença materna associada à dadora. As células foram imortalizadas por transfecção com o gene do antígeno T grande do vírus simiano 40, resultando numa linha celular transformada (CVCL_7162) com capacidade proliferativa indefinida [1]. Confirmou-se que tanto a linha parental HTR-8 como a linha HTR-8/SVneo resultante eram positivas para citoqueratina, o que confirma a sua identidade trofoblástica epitelial. A linha transfectada secreta exclusivamente gonadotrofina coriônica humana, uma característica que não se observa nas células parentais.

A caracterização posterior revelou que a HTR-8/SVneo não é uma população homogénea de trofoblastos. Abou-Kheir e colegas demonstraram que a linha contém duas populações celulares distintas: uma com características de trofoblastos epiteliais e outra com características mesenquimais ou estromais [2]. Esta população mista tem implicações na interpretação dos resultados experimentais, nomeadamente em ensaios de invasão e migração. A análise citogenómica revelou ainda que a HTR-8/SVneo apresenta um cariótipo quase triploide, com aberrações cromossómicas inter e intraclonais decorrentes de uma cultura prolongada [3]. A análise do perfil molecular confirmou que o HTR-8/SVneo partilha vários, mas não todos, os marcadores característicos das subpopulações de trofoblastos extravilosos primários [4].

HTR-8/SVneo — Informações sobre a cultura

Vantagens das células HTR-8/SVneo

As células HTR-8/SVneo oferecem várias vantagens significativas para a investigação placentária e reprodutiva. A imortalização por SV40 confere a esta linha uma vida útil estável e prolongada, ultrapassando largamente as 12 a 14 passagens que se conseguem com as células HTR-8 parentais [1]. Esta longevidade permite a realização de experiências em grande escala e reproduzíveis, sem os desafios logísticos associados à obtenção de trofoblastos primários frescos. As células mantêm marcadores trofoblásticos essenciais — incluindo a expressão de citoqueratina e a secreção de gonadotrofina coriônica humana —, proporcionando um contexto biologicamente relevante para estudos mecanísticos da função placentária.

A capacidade de resposta desta linha celular a um vasto leque de manipulações experimentais torna-a particularmente versátil. Os investigadores têm aplicado com sucesso a interferência de ARN, a sobreexpressão de plasmídeos, o knockout com CRISPR-Cas9 e tratamentos farmacológicos às células HTR-8/SVneo no âmbito de diversas questões de investigação [5] [6]. As células respondem de forma previsível a condições hipóxicas, ambientes com níveis elevados de glicose e estimulação por citocinas, reproduzindo fielmente aspetos de estados patológicos, incluindo a pré-eclâmpsia e a diabetes mellitus gestacional [7] [8]. Além disso, um conjunto cada vez maior de linhas knockout derivadas permite a realização de estudos de genómica funcional direcionados, sem necessidade de recriar a linha parental a partir do zero.

Limitações das células HTR-8/SVneo

A limitação mais significativa do HTR-8/SVneo é a sua população celular mista. Estudos de caracterização confirmaram a coexistência de células epiteliais do tipo trofoblasto e de células mesenquimais do tipo estromal na mesma cultura [2]. Esta heterogeneidade complica a atribuição das observações experimentais a um único tipo celular definido. Os resultados obtidos a partir de populações globais podem ocultar respostas específicas de subpopulações, pelo que é necessário ter cuidado ao extrapolar as conclusões para o comportamento de trofoblastos primários puros.

O cariótipo quase triploide e aneuploide do HTR-8/SVneo constitui uma ressalva adicional [3]. A instabilidade cromossómica, que pode aumentar com o número de passagens, pode alterar a dosagem genética e, consequentemente, influenciar os resultados das vias de sinalização. Além disso, embora as células HTR-8/SVneo partilhem vários marcadores moleculares com os trofoblastos extravilosos primários, não reproduzem na íntegra todas as características de nenhuma subpopulação específica de trofoblastos primários [4]. Os investigadores devem, por conseguinte, complementar os dados do HTR-8/SVneo com validação em células primárias ou modelos in vivo sempre que possível, especialmente no caso de estudos que envolvam diferenciação ou função endócrina.

Aplicações das células HTR-8/SVneo

Investigação sobre a pré-eclâmpsia

A pré-eclâmpsia (PE) é uma das doenças da gravidez mais intensamente estudadas com recurso às células HTR-8/SVneo. Esta linha celular serve como um modelo in vitro acessível para a disfunção trofoblástica induzida pela hipoxia, uma característica central da patogénese da PE. Fan e colegas utilizaram células HTR-8/SVneo cultivadas em condições hipóxicas para demonstrar que o recetor de estrogénio α (ERα) ativa transcripcionalmente o ACSL4, promovendo a ferroptose — uma forma de morte celular dependente do ferro — nos trofoblastos placentários [9]. O silenciamento do ERα atenuou os marcadores de stress oxidativo e restaurou a viabilidade celular, identificando um novo eixo terapêutico.

Os mecanismos epigenéticos e transcricionais na PE também foram elucidados com este modelo. Zhao e colegas demonstraram que a modificação H3K4me3 mediada por SETD7 no promotor do LncRNA XIST induz a piroptose dos trofoblastos através de um eixo FOXA1/TMBIM4/GSDMD-N em células HTR-8/SVneo submetidas a hipóxia e reoxigenação [7]. Por outro lado, Zhu e colegas descobriram que a PTPRN2 — cuja expressão está aumentada nas células HTR-8/SVneo hipóxicas — suprime a invasão do trofoblasto ao inibir a via Wnt/β-catenina, estabelecendo uma ligação entre a sinalização anómala da tirosina fosfatase e a placentação superficial na PE [10]. Wang e colegas demonstraram ainda que o fator de transcrição IRF1 regula a PANoptose em células HTR-8/SVneo hipóxicas através da HDAC1, proporcionando uma perspetiva sobre as vias multimodais de morte celular que atuam na PE [11].

O CCN5 (WISP-2) revelou-se como mais um regulador do comportamento dos trofoblastos na PE. Gong e colegas relataram que a sobreexpressão do CCN5 nas células HTR-8/SVneo inibiu significativamente a proliferação, a migração, a invasão e a transição epitelial-mesenquimal, enquanto a supressão do CCN5 teve os efeitos opostos [12]. Cheng e colegas demonstraram ainda que o TGFβ1 inibe a migração, a invasão e a proliferação das células HTR-8/SVneo através de uma ativação da via TLR4/NF-κB mediada pela transglutaminase tecidual, estabelecendo uma ligação mecânica entre a fibrose placentária e a disfunção trofoblástica na PE [13].

Diabetes gestacional e disfunção trofoblástica

A diabetes mellitus gestacional (DMG) cria um microambiente placentário hiperglicémico que prejudica a função dos trofoblastos. As células HTR-8/SVneo tratadas com concentrações elevadas de glicose reproduzem aspetos-chave da lesão dos trofoblastos associada à DMG. Lin e colegas utilizaram este modelo para investigar a ferroptose placentária na DMG, analisando a ultraestrutura, a geração de espécies reativas de oxigénio e a acumulação de ferro. Descobriram que a metformina atenuava os marcadores de ferroptose tanto nas células HTR-8/SVneo como nas amostras placentárias de doentes com DMG, sugerindo um mecanismo protetor para este medicamento antidiabético. [14].

Zhang e colegas identificaram a neurotrofina-4 (NTF4) como um fator associado à DMG, cuja expressão estava aumentada no tecido placentário de pacientes afetadas. Em células HTR-8/SVneo submetidas a um desafio de glicose elevada, o silenciamento da NTF4 reduziu a apoptose e a secreção de citocinas inflamatórias, ao mesmo tempo que restaurou a capacidade proliferativa. Estes efeitos foram mediados pela via de sinalização PI3K/AKT, o que aponta para a NTF4 como um potencial alvo terapêutico na disfunção placentária relacionada com a DMG. [8]. Além disso, Yu e colegas demonstraram que os níveis séricos de miR-320a estão elevados em doentes com DMG e que este microRNA atua diretamente sobre um gene regulador chave nas células HTR-8/SVneo, inibindo a proliferação e promovendo a apoptose. Este microRNA revelou também valor preditivo para a macrossomia fetal, estabelecendo uma ligação entre as alterações moleculares ao nível do trofoblasto e os resultados neonatais adversos [15].

Aborto espontâneo recorrente e perda de gravidez

As células HTR-8/SVneo constituem uma ferramenta valiosa para o estudo do aborto espontâneo recorrente (AER) e da disfunção trofoblástica associada. Huang e colegas induziram a ferroptose nas células HTR-8/SVneo utilizando erastina, para simular a lesão trofoblástica associada ao AER. Descobriram que a formulação de medicina tradicional chinesa Anzi Tiaochong Tang inibia a ferroptose através do eixo METTL14/m6A/SLC39A14, reduzindo a acumulação de ferro e o stress oxidativo. Este estudo demonstrou como a metilação do ARN m6A coordena o metabolismo do ferro nos trofoblastos e identificou uma potencial estratégia terapêutica para o RSA. [16].

O papel da reprogramação epitranscriptómica da N6-metiladenosina (m6A) na viabilidade dos trofoblastos foi explorado mais aprofundadamente por Ye e Deng, que demonstraram que a METTL14 promove a disfunção dos trofoblastos ao aumentar a expressão de SZRD1 de forma dependente da m6A nas células HTR-8/SVneo. Os níveis elevados de SZRD1 prejudicaram a proliferação, a migração, a invasão e a angiogénese, refletindo a invasão superficial do trofoblasto característica da pré-eclâmpsia e da perda precoce da gravidez [17]. Em conjunto, estes estudos destacam as células HTR-8/SVneo como uma plataforma eficaz para a análise da regulação epitranscriptómica na patologia reprodutiva.

A invasão trofoblástica é também regulada por microARN ativos durante a placentação precoce. Arora e colegas utilizaram células HTR-8/SVneo para demonstrar que o miR-22-3p tem como alvo a Sp1, reduzindo assim a expressão da cistationina β-sintase e diminuindo a atividade da MMP-2 e da MMP-9. Esta cascata restringe a capacidade invasiva do trofoblasto e pode contribuir para os defeitos de placentação subjacentes à pré-eclâmpsia de início precoce e a outros resultados adversos [18].

Toxicologia Ambiental e Segurança Reprodutiva

As células HTR-8/SVneo revelaram-se altamente adequadas para avaliar a toxicidade reprodutiva de contaminantes ambientais e agentes farmacológicos. Zhang e colegas investigaram o antioxidante 6PPD, presente nos pneus, demonstrando que a exposição a doses elevadas induzia a senescência celular nas células HTR-8/SVneo, através da supressão da ubiquitinação e degradação da p21 mediadas pela BAZ1B. Este programa de senescência comprometeu a função do trofoblasto e foi associado a abortos espontâneos inexplicáveis num estudo clínico de caso-controlo, estabelecendo uma ligação mecânica entre a poluição derivada dos pneus e a perda da gravidez [19].

As questões relativas à segurança farmacológica foram abordadas por Liu e colegas, que utilizaram células HTR-8/SVneo para desvendar o mecanismo da toxicidade reprodutiva induzida pela triptolida. A combinação das técnicas MeRIP-seq e mRNA-seq revelou que a triptolida — o componente ativo do Tripterygium wilfordii — reprogramou extensivamente o epitranscriptoma m6A, alterando a expressão de mais de 1 700 genes e induzindo lesões nas células trofoblásticas [6]. Hu e colegas demonstraram ainda que a depleção de glutationa nas células HTR-8/SVneo aumenta as espécies reativas de oxigénio, provoca danos no ADN e ativa a via inflamatória cGAS-STING — um mecanismo relevante para a lesão placentária oxidativa resultante de exposições ambientais [5].

Estudos no contexto das doenças hepáticas relacionadas com a gravidez demonstram ainda mais a versatilidade das células HTR-8/SVneo. Xu e colegas utilizaram esta linha celular, em conjunto com a metabolómica espacial, para investigar de que forma a acumulação de ácidos biliares na colestase intra-hepática da gravidez (ICP) induz a apoptose dos trofoblastos através da reprogramação metabólica dos glicerofosfolípidos [20]. Liu e colegas validaram, separadamente, os efeitos protetores do líquido oral de medicina tradicional chinesa Yinzhihuang em células HTR-8/SVneo induzidas por ácido taurocolico, demonstrando a sua capacidade de restaurar a viabilidade dos trofoblastos em condições colestáticas [21].

Conclusão

As células HTR-8/SVneo continuam a ser um dos modelos de trofoblastos humanos mais produtivos e amplamente utilizados na biologia reprodutiva. Desde a elucidação dos mecanismos da pré-eclâmpsia, da diabetes mellitus gestacional e do aborto espontâneo até à avaliação dos riscos reprodutivos decorrentes de poluentes ambientais e agentes farmacológicos, esta linha celular tem demonstrado uma utilidade notável em diversos contextos de investigação. A sua capacidade de resposta à hipoxia, à hiperglicemia e à manipulação epigenética — combinada com a disponibilidade de um conjunto cada vez maior de linhas derivadas com genes inativados — garante que as células HTR-8/SVneo continuarão a fornecer conhecimentos fundamentais sobre a fisiologia e a patologia placentárias. Os investigadores que procurem um modelo de trofoblasto bem caracterizado e biologicamente relevante considerarão as células HTR-8/SVneo uma ferramenta indispensável. Para adquirir células HTR-8/SVneo ou fazer uma consulta, visite cytion.com.

Publicações principais

1. Graham CH, Hawley TS, Hawley RG, MacDougall JR, Kerbel RS, Khoo N, Lala PK (1993) Estabelecimento e caracterização de células trofoblásticas humanas do primeiro trimestre com tempo de vida prolongado. Experimental Cell Research. PMID: 7684692
2. Abou-Kheir W, Barrak J, Hadadeh O, Daoud G (2017) A linha celular HTR-8/SVneo contém uma população mista de células. Placenta. PMID: 28161053
3. Weber M, Weise A, Vasheghani F (2021) Citogenómica de seis linhas celulares trofoblásticas humanas. Placenta. PMID: 33096371
4. Pastuschek J, Nonn O, Gutiérrez-Samudio RN (2021) Características moleculares de linhas celulares estabelecidas derivadas do trofoblasto. Placenta. PMID: 33810901
5. Hu S, Liu W, Dong Y (2026) A diminuição dos níveis de glutationa ativa a via de sinalização cGAS-STING através do stress oxidativo na pré-eclâmpsia. Imunologia molecular. PMID: 42068604
6. Liu X, Wu Y, Tian J (2026) A reprogramação do epitranscriptoma m(6)A está na origem da toxicidade reprodutiva induzida pela triptolida nas células HTR-8/SVneo. Toxics. PMID: 42043161
7. Zhao X, Li L, Wang Y (2026) A regulação epigenética do LncRNA XIST mediada pelo SETD7 promove a piroptose dos trofoblastos: um estudo em modelos de ratos e celulares de pré-eclâmpsia. Biology Direct. PMID: 42177518
8. Zhang L, Yang J (2026) A inibição do NTF4 atenua a apoptose e a inflamação induzidas por níveis elevados de glicose nas células HTR-8/SVneo através da via PI3K/AKT. Imunidade, inflamação e doença. PMID: 42036822
9. Fan X, Yang Y, Zhu X (2026) O ERα facilita a ferroptose induzida pela hipoxia nos trofoblastos placentários através da ativação transcricional do ACSL4. American Journal of Reproductive Immunology. PMID: 42160036
10. Zhu T, Zeng WJ, Zhang Y (2026) O PTPRN2 induzido pela hipoxia suprime a invasão do trofoblasto através da inibição da via Wnt/β-catenina. Current Medical Science. PMID: 42154150
11. Wang Z, Cheng L, Li G (2026) O fator de transcrição IRF1 modula a HDAC1 e a PANoptose para regular a progressão da pré-eclâmpsia. Biology Direct. PMID: 42035194
12. Gong Y, Li J, Wang C (2026) A sobreexpressão de CCN5 inibe a proliferação, a migração, a invasão e a transição epitelial-mesenquimal das células trofoblásticas HTR-8/SVneo. European Journal of Pharmacology. PMID: 42178008
13. Cheng M, Di X, Chen Q (2026) O TGFβ1 inibe a migração, a invasão e a proliferação das células HTR-8/Svneo através da via de sinalização TLR4/NF-κB ativada pela tTG. Journal of biochemical and molecular toxicology. PMID: 42008735
14. Lin Q, Qin X, Shen M (2026) Metformina e ferroptose placentária na diabetes gestacional: um estudo mecanístico. Journal of diabetes research. PMID: 42237524
15. Yu R, Liu X, Zhang S (2026) Identificação do miR-320a sérico na diabetes mellitus gestacional para a previsão da macrossomia e investigação mecanicista in vitro. BMC Medical Genomics. PMID: 42210203
16. Huang S, Yu M, Luo Y (2026) O Anzi Tiaochong Tang inibe a ferroptose dos trofoblastos através do eixo METTL14/m6A/SLC39A14 no aborto espontâneo recorrente. Frontiers in pharmacology. PMID: 42137328
17. Ye Q, Deng L (2026) A METTL14 promove a disfunção do trofoblasto ao aumentar a expressão de SZRD1 de forma dependente de m6A. Human Cell. PMID: 42133253
18. Arora P, Kalra S, Dhingra R (2025) MicroRNA-22 (miR-22) regula a invasão das células trofoblásticas através da via da proteína de especificidade 1 (Sp1)/cistationina β-sintase (CBS)/metaloproteinases da matriz 2 e 9 (MMP-2 e MMP-9). Cureus. PMID: 41583211
19. Zhang W, Liang Y, Sun Y (2026) A exposição a doses elevadas do antioxidante 6PPD, presente nos pneus, provoca senescência, o que induz abortos espontâneos inexplicáveis ao inibir a degradação por ubiquitinação da proteína P21, mediada pela proteína BAZ1B. EBioMedicine. PMID: 42224779
20. Xu ZT, Ge LX, Luo L (2026) A acumulação de PIP(2) no espongiotrofoblasto induz a apoptose do trofoblasto na colestase intra-hepática da gravidez. Molecular reproduction and development. PMID: 42017405
21. Liu T, Zhuang X, Gu W (2025) O líquido oral Yinzhihuang alivia a colestase intra-hepática da gravidez: uma abordagem integrada de bioinformática e perspetivas mecanistas experimentais. Medicina materno-fetal. PMID: 41608209