Клітини HTR-8/SVneo - також відома як HTR-8/SV neo, HTR-8/SV-neo, HTR8/SVneo та HTR8svn — це широко використовувана лінія клітин трофобласта людини, створена Гремом та ін. у 1993 році [1]. Цю лінію було створено шляхом введення великого Т-антигену вірусу мавп № 40 у трофобласти людини першого триместру, що забезпечило клітинам подовжений термін життя, який значно перевищує 12–14 пасажів, характерних для вихідної лінії HTR-8. З моменту свого створення клітини HTR-8/SVneo стали незамінною in vitro моделлю для вивчення біології трофобластів плаценти, зокрема клітинної інвазії, міграції та проліферації. Дослідники у всьому світі використовують цю лінію для вивчення порушень вагітності, таких як прееклампсія, гестаційний цукровий діабет та рецидивні самовільні аборти, а також для дослідження впливу екологічних токсикантів та фармакологічних засобів на функцію трофобластів.

Основні висновки

• HTR-8/SVneo — це лінія людських трофобластів, імунізованих вірусом SV40, отримана з тканини плаценти першого триместру (номер збору в базі даних Cellosaurus: CVCL_7162).
• Ця лінія містить змішану популяцію клітин, схожих на епітеліальні трофобласти та мезенхімальні/стромальні клітини, що робить її моделлю для досліджень епітеліально-мезенхімального переходу (ЕМТ) [2].
• Клітини HTR-8/SVneo широко використовуються для дослідження прееклампсії, гестаційного цукрового діабету, рецидивуючих самовільних викиднів та внутрішньопечінкового холестазу вагітності.
• Ця лінія має майже триплоїдний каріотип із внутрішньоклональною мінливістю — ознакою, характерною для трофобластичних клітинних ліній, що культивуються протягом тривалого часу [3].
• Клітини HTR-8/SVneo входять до переліку типових клітинних типів (рівень 3) проекту ENCODE, і щодо них доступні омічні дані про метилювання ДНК.
• Було створено десятки похідних нокаутних та репортерних ліній, що свідчить про широку застосовність цієї батьківської клітинної лінії у функціональній геноміці.

Що таке HTR-8/SVneo?

Лінія HTR-8/SVneo була створена з трофобластів людської плаценти першого триместру, отриманих від донора невизначеної статі на терміні вагітності 6–12 тижнів. У донора не було зафіксовано жодних супутніх захворювань. Клітини були імунізовані шляхом трансфекції геном великого Т-антигену вірусу мавп 40, в результаті чого було отримано трансформовану клітинну лінію (CVCL_7162) з необмеженою здатністю до проліферації. [1]. Було підтверджено, що як батьківська лінія HTR-8, так і отримана в результаті лінія HTR-8/SVneo є цитокератинопозитивними, що підтверджує їх епітеліально-трофобластичну природу. Трансфікована лінія унікальним чином секретує людський хоріонічний гонадотропін — ознака, яка не спостерігається у батьківських клітинах.

Подальша характеристика показала, що HTR-8/SVneo не є однорідною популяцією трофобластів. Абу-Хейр та його колеги довели, що ця лінія містить дві різні клітинні популяції: одну з епітеліальними ознаками трофобластів, а іншу — з мезенхімальними або стромальними ознаками [2]. Таке змішане населення впливає на інтерпретацію результатів експериментів, зокрема в тестах на інвазію та міграцію. Цитогеномний аналіз також показав, що штам HTR-8/SVneo має майже триплоїдний каріотип із між- та внутрішньоклональними хромосомними абераціями, що виникли внаслідок тривалого культивування [3]. Молекулярне профілювання підтвердило, що HTR-8/SVneo має кілька, але не всі, маркери, характерні для субпопуляцій первинного екстравільозного трофобласта [4].

HTR-8/SVneo — Інформація про культуру

Переваги елементів HTR-8/SVneo

Клітини HTR-8/SVneo мають низку вагомих переваг для досліджень плаценти та репродуктивної системи. Імморталізація за допомогою вірусу SV40 забезпечує цій лінії стабільний, подовжений термін життя, що значно перевищує 12–14 пасажів, яких можна досягти з вихідними клітинами HTR-8 [1]. Така тривалість життя дозволяє проводити масштабні, відтворювані експерименти без логістичних труднощів, пов’язаних із пошуком свіжих первинних трофобластів. Клітини зберігають ключові маркери трофобластів — зокрема експресію цитокератину та секрецію хоріонічного гонадотропіну людини — забезпечуючи біологічно релевантний контекст для механістичних досліджень функції плаценти.

Здатність цієї лінії реагувати на широкий спектр експериментальних маніпуляцій робить її особливо універсальною. Дослідники успішно застосовували РНК-інтерференцію, гіперекспресію плазмідів, нокаут за допомогою CRISPR-Cas9 та фармакологічні методи впливу до клітин HTR-8/SVneo для вивчення різноманітних наукових питань [5] [6]. Клітини передбачувано реагують на гіпоксичні умови, середовища з високим рівнем глюкози та стимуляцію цитокінами, точно відтворюючи особливості таких патологічних станів, як прееклампсія та гестаційний цукровий діабет [7] [8]. Крім того, дедалі більший набір похідних нокаутних ліній дає змогу проводити цілеспрямовані дослідження в галузі функціональної геноміки без необхідності створювати батьківську лінію заново.

Обмеження клітин HTR-8/SVneo

Найбільш суттєвим обмеженням HTR-8/SVneo є неоднорідний склад клітинної популяції. Дослідження з характеристики підтвердили співіснування епітеліальних клітин, схожих на трофобласти, та мезенхімальних клітин, схожих на стромальні, в одній культурі [2]. Ця неоднорідність ускладнює віднесення експериментальних спостережень до одного конкретного типу клітин. Результати, отримані на основі загальних популяцій, можуть затуляти реакції, характерні для окремих субпопуляцій, тому слід бути обережними при екстраполяції цих даних на поведінку чистих первинних трофобластів.

Ще одним застереженням є майже триплоїдний та анеуплоїдний каріотип сорту HTR-8/SVneo [3]. Хромосомна нестабільність, яка може посилюватися з кожним пасажем, може змінювати дозування генів і, як наслідок, впливати на результати сигнальних шляхів. Крім того, хоча клітини HTR-8/SVneo мають багато спільних молекулярних маркерів із первинними екстравілозними трофобластами, вони не відтворюють у повному обсязі всіх ознак жодної окремої субпопуляції первинних трофобластів [4]. Тому дослідникам слід, по можливості, доповнювати дані HTR-8/SVneo результатами валідації на первинних клітинах або моделями in vivo, особливо в дослідженнях, що стосуються диференціації або ендокринної функції.

Сфери застосування клітин HTR-8/SVneo

Дослідження прееклампсії

Прееклампсія (ПЕ) є одним із найбільш інтенсивно досліджуваних порушень вагітності з використанням клітин HTR-8/SVneo. Ця клітинна лінія слугує зручною моделлю in vitro для вивчення дисфункції трофобластів, спричиненої гіпоксією, що є центральною особливістю патогенезу ПЕ. Фан та колеги використовували клітини HTR-8/SVneo, культивовані в гіпоксичних умовах, щоб продемонструвати, що естрогеновий рецептор α (ERα) активує транскрипцію гена ACSL4, сприяючи фероптозу — формі залізозалежної загибелі клітин — у трофобластах плаценти [9]. Пригнічення ERα призвело до зниження рівнів маркерів окисного стресу та відновлення життєздатності клітин, що дозволило виявити новий терапевтичний механізм.

За допомогою цієї моделі також було з’ясовано епігенетичні та транскрипційні механізми при ПЕ. Чжао та колеги показали, що опосередкована SETD7 модифікація H3K4me3 на промоторі LncRNA XIST стимулює піроптоз трофобластів через вісь FOXA1/TMBIM4/GSDMD-N у клітинах HTR-8/SVneo, що піддавалися гіпоксії та реоксигенації [7]. Крім того, Чжу та його колеги виявили, що білок PTPRN2 — експресія якого підвищена в гіпоксичних клітинах HTR-8/SVneo — пригнічує інвазію трофобластів шляхом інгібування сигнального шляху Wnt/β-катенін, пов’язуючи порушення сигнального шляху тирозинової фосфатази з поверхневим прикріпленням плаценти при прееклампсії [10]. Ван та його колеги також продемонстрували, що транскрипційний фактор IRF1 регулює PANоптоз у гіпоксичних клітинах HTR-8/SVneo через HDAC1, що дає уявлення про мультимодальні шляхи клітинної смерті, які діють при ПЕ [11].

CCN5 (WISP-2) виявився ще одним регулятором поведінки трофобластів при прееклампсії. Гонг та його колеги повідомили, що надмірна експресія CCN5 у клітинах HTR-8/SVneo суттєво пригнічувала проліферацію, міграцію, інвазію та епітеліально-мезенхімальний перехід, тоді як пригнічення експресії CCN5 мало протилежні ефекти [12]. Ченг та його колеги також продемонстрували, що TGFβ1 пригнічує міграцію, інвазію та проліферацію клітин HTR-8/SVneo шляхом активації шляху TLR4/NF-κB за участю тканинної трансглутамінази, що вказує на механістичний зв’язок між фіброзом плаценти та дисфункцією трофобластів при прееклампсії [13].

Гестаційний діабет і дисфункція трофобластів

Гестаційний цукровий діабет (ГЦД) створює гіперглікемічне мікросередовище плаценти, що порушує функцію трофобластів. Клітини HTR-8/SVneo, оброблені високими концентраціями глюкози, відтворюють ключові аспекти ураження трофобластів, пов’язаного з ГЦД. Лін та колеги використали цю модель для дослідження фероптозу плаценти при ГЦД, проаналізувавши ультраструктуру, утворення активних форм кисню та накопичення заліза. Вони виявили, що метформін послаблював маркери фероптозу як у клітинах HTR-8/SVneo, так і в зразках плаценти пацієнток із ГЦД, що свідчить про захисний механізм дії цього протидіабетичного препарату. [14].

Чжан та його колеги визначили нейротрофін-4 (NTF4) як фактор, пов’язаний із ГДМ, рівень якого підвищений у тканині плаценти хворих пацієнток. У клітинах HTR-8/SVneo, підданих впливу високого рівня глюкози, пригнічення експресії NTF4 зменшувало апоптоз та секрецію запальних цитокінів, одночасно відновлюючи проліферативну здатність. Ці ефекти опосередковувалися сигнальним шляхом PI3K/AKT, що вказує на NTF4 як потенційну терапевтичну мішень при дисфункції плаценти, пов’язаній із ГЦД. [8]. Крім того, Ю та його колеги продемонстрували, що рівень miR-320a в сироватці крові у пацієнток із ГДМ підвищений і що ця мікроРНК безпосередньо впливає на ключовий регуляторний ген у клітинах HTR-8/SVneo, пригнічуючи їх проліферацію та сприяючи апоптозу. Ця мікроРНК також мала прогностичне значення щодо макросомії плода, пов’язуючи молекулярні зміни на рівні трофобластів із несприятливими наслідками для новонароджених [15].

Повторні самовільні викидні та втрата вагітності

Клітини HTR-8/SVneo є цінним інструментом для вивчення рецидивуючих самовільних абортів (RSA) та пов’язаної з ними дисфункції трофобластів. Хуан та його колеги індукували фероптоз у клітинах HTR-8/SVneo за допомогою ерастину, щоб змоделювати пошкодження трофобластів, пов’язане з RSA. Вони виявили, що препарат традиційної китайської медицини «Анцзі Тяочонг Тан» пригнічував фероптоз через вісь METTL14/m6A/SLC39A14, зменшуючи накопичення заліза та окислювальний стрес. Це дослідження продемонструвало, як метилювання РНК m6A координує метаболізм заліза в трофобластах, та визначило потенційну терапевтичну стратегію для лікування РСА. [16].

Роль епітранскриптомного перепрограмування N6-метиладенозину (m6A) у життєздатності трофобластів була додатково досліджена Є та Денгом, які продемонстрували, що METTL14 сприяє дисфункції трофобластів шляхом посилення експресії SZRD1 у m6A-залежний спосіб у клітинах HTR-8/SVneo. Підвищений рівень SZRD1 порушував проліферацію, міграцію, інвазію та ангіогенез, що відображає поверхневу інвазію трофобластів, характерну для прееклампсії та ранніх викиднів [17]. У сукупності ці дослідження підкреслюють, що клітини HTR-8/SVneo є ефективною платформою для вивчення епітранскриптомної регуляції в репродуктивній патології.

Інвазія трофобластів також регулюється мікроРНК, активними на ранніх стадіях формування плаценти. Арора та колеги, використовуючи клітини HTR-8/SVneo, продемонстрували, що miR-22-3p діє на Sp1, тим самим знижуючи експресію цистатионін-β-синтази та зменшуючи активність MMP-2 і MMP-9. Цей каскад обмежує інвазивну здатність трофобластів і може сприяти розвитку дефектів плацентації, що лежать в основі ранньої прееклампсії та інших несприятливих наслідків [18].

Екологічна токсикологія та репродуктивна безпека

Клітини HTR-8/SVneo виявилися надзвичайно придатними для оцінки репродуктивної токсичності екологічних забруднювачів та фармакологічних речовин. Чжан та його колеги досліджували антиоксидант 6PPD, що міститься у шинах, і продемонстрували, що вплив високих доз індукував клітинне старіння в клітинах HTR-8/SVneo шляхом пригнічення опосередкованої BAZ1B убіквітинізації та деградації p21. Ця програма старіння порушувала функцію трофобластів і була пов’язана з невизначеними причинами викиднів у клінічному дослідженні «випадок-контроль», що дозволило встановити механістичний зв’язок між забрудненням, пов’язаним із шинами, та втратою вагітності [19].

Питання фармакологічної безпеки розглядали Лю та його колеги, які використовували клітини HTR-8/SVneo для з’ясування механізму репродуктивної токсичності, спричиненої триптолідом. Комбіновані методи MeRIP-seq та mRNA-seq показали, що триптолід — активний компонент Tripterygium wilfordii — суттєво перепрограмував епітранскриптом m6A, змінюючи експресію понад 1 700 генів та спричиняючи ушкодження трофобластних клітин [6]. Ху та його колеги також продемонстрували, що виснаження запасів глутатіону в клітинах HTR-8/SVneo призводить до підвищення рівня активних форм кисню, викликає пошкодження ДНК та активує запальний шлях cGAS-STING — механізм, пов’язаний з окислювальним ураженням плаценти внаслідок впливу факторів навколишнього середовища [5].

Дослідження в контексті захворювань печінки, пов’язаних із вагітністю, ще раз підтверджують універсальність клітин HTR-8/SVneo. Сюй та його колеги використовували цю клітинну лінію в поєднанні з просторовою метаболомікою для вивчення того, як накопичення жовчних кислот при внутрішньопечінковому холестазі вагітності (ICP) спричиняє апоптоз трофобластів шляхом перепрограмування метаболізму гліцерофосфоліпідів [20]. Лю та його колеги окремо підтвердили захисну дію перорального розчину «Іньчжихуан» — препарату традиційної китайської медицини — на клітини HTR-8/SVneo, у яких було індуковано торохолевою кислотою, продемонструвавши його здатність відновлювати життєздатність трофобластів у холестатичних умовах [21].

Висновок

Клітини HTR-8/SVneo залишаються однією з найпродуктивніших і найпоширеніших моделей людських трофобластів у репродуктивній біології. Від з’ясування механізмів прееклампсії, гестаційного цукрового діабету та самовільного аборту до оцінки репродуктивної небезпеки екологічних забруднювачів та фармакологічних препаратів — ця клітинна лінія продемонструвала надзвичайну корисність у різноманітних наукових контекстах. Їхня чутливість до гіпоксії, гіперглікемії та епігенетичних маніпуляцій — у поєднанні з наявністю дедалі ширшого набору похідних нокаутних ліній — гарантує, що клітини HTR-8/SVneo й надалі даватимуть фундаментальні знання про фізіологію та патологію плаценти. Для дослідників, які шукають добре охарактеризовану, біологічно релевантну модель трофобластів, клітини HTR-8/SVneo стануть незамінним інструментом. Щоб придбати клітини HTR-8/SVneo або надіслати запит, відвідайте cytion.com.

Основні публікації

1. Грем Ч. Х., Хоулі Т. С., Хоулі Р. Г., Макдугалл Дж. Р., Кербель Р. С., Кху Н., Лала П. К. (1993) Виведення та характеристика клітин трофобласта людини першого триместру з подовженим терміном життя. Experimental Cell Research. PMID: 7684692
2. Абу-Хейр В., Баррак Дж., Хададе О., Дауд Г. (2017) Клітинна лінія HTR-8/SVneo містить змішану популяцію клітин. Placenta. PMID: 28161053
3. Вебер М., Вайзе А., Вашегані Ф. (2021) Цитогеноміка шести ліній трофобластичних клітин людини. Placenta. PMID: 33096371
4. Пастушек Дж., Нонн О., Гутьєррес-Самудіо Р. Н. (2021) Молекулярні характеристики встановлених клітинних ліній, отриманих із трофобластів. Placenta. PMID: 33810901
5. Ху С., Лю В., Донг Ю. (2026) Виснаження запасів глутатіону активує сигнальний шлях cGAS-STING через окислювальний стрес при прееклампсії. Молекулярна імунологія. PMID: 42068604
6. Лю С., Ву Ю., Тянь Ц. (2026) Перепрограмування епітранскриптома m(6)A зумовлює індуковану триптолідом репродуктивну токсичність у клітинах HTR-8/SVneo. Toxics. PMID: 42043161
7. Чжао С., Лі Л., Ван Ю. (2026) Опосередкована SETD7 епігенетична регуляція LncRNA XIST сприяє піроптозу трофобластів: дослідження на мишачих та клітинних моделях прееклампсії. Biology Direct. PMID: 42177518
8. Чжан Л., Ян Ц. (2026) Інгібування NTF4 послаблює індуковані високим рівнем глюкози апоптоз та запалення в клітинах HTR-8/SVneo через шлях PI3K/AKT. Імунітет, запалення та захворювання. PMID: 42036822
9. Фан С., Ян Ю., Чжу С. (2026) ERα сприяє гіпоксією індукованому фероптозу в трофобластах плаценти шляхом транскрипційної активації ACSL4. «Американський журнал репродуктивної імунології». PMID: 42160036
10. Чжу Т., Цзен В. Цзян, Чжан Ю. (2026) Індукований гіпоксією PTPRN2 пригнічує інвазію трофобластів шляхом інгібування сигнального шляху Wnt/β-катенін. «Сучасна медична наука». PMID: 42154150
11. Ван Ц., Чен Л., Лі Г. (2026) Транскрипційний фактор IRF1 модулює активність HDAC1 та PANoptosis, регулюючи прогресування прееклампсії. Biology Direct. PMID: 42035194
12. Гонг Й., Лі Ц., Ван Ц. (2026) Надмірна експресія CCN5 пригнічує проліферацію, міграцію, інвазію та епітеліально-мезенхімальний перехід трофобластних клітин HTR-8/SVneo. European journal of pharmacology. PMID: 42178008
13. Чен М., Ді С., Чен Ц. (2026) TGFβ1 пригнічує міграцію, інвазію та проліферацію клітин HTR-8/Svneo через сигнальний шлях TLR4/NF-κB, активований tTG. Журнал біохімічної та молекулярної токсикології. PMID: 42008735
14. Лін Ц., Цін С., Шень М. (2026) Метформін та фероптоз плаценти при гестаційному діабеті: механістичне дослідження. Journal of diabetes research. PMID: 42237524
15. Ю Р., Лю С., Чжан С. (2026) Виявлення miR‑320a в сироватці крові у пацієнток із гестаційним цукровим діабетом для прогнозування макросомії та механістичне дослідження in vitro. BMC Medical Genomics. PMID: 42210203
16. Хуан С., Ю М., Луо Ю. (2026) Препарат «Анцзі Тяочонг Тан» пригнічує фероптоз трофобластів через вісь METTL14/m6A/SLC39A14 у випадках рецидивуючих самовільних викиднів. Frontiers in pharmacology. PMID: 42137328
17. Ye Q, Deng L (2026) METTL14 сприяє дисфункції трофобластів шляхом підвищення експресії SZRD1 у спосіб, що залежить від m6A. Human Cell. PMID: 42133253
18. Арора П., Калра С., Дхінгра Р. (2025) МікроРНК-22 (miR-22) регулює інвазію трофобластних клітин через шлях, що включає білок специфічності 1 (Sp1)/цистатионін-β-синтазу (CBS)/матричні металопротеїнази 2 та 9 (MMP-2 та MMP-9). Cureus. PMID: 41583211
19. Чжан В., Лян Ю., Сунь Ю. (2026) Вплив високих доз антиоксиданту 6PPD, що міститься в шинах, призводить до старіння клітин, що, у свою чергу, викликає невизначені причини викиднів шляхом пригнічення убіквітинізації та деградації білка P21, опосередкованої білком BAZ1B. EBioMedicine. PMID: 42224779
20. Сюй З.Т., Ге Л.С., Луо Л. (2026) Накопичення PIP(2) у спонгіотрофобласті зумовлює апоптоз трофобластів при внутрішньопечінковому холестазі вагітності. «Молекулярна репродукція та розвиток». PMID: 42017405
21. Лю Т., Чжуан С., Гу В. (2025) Рідкий препарат «Іньчжихуан» для перорального застосування полегшує внутрішньопечінковий холестаз під час вагітності: комплексний аналіз на основі біоінформатики та експериментальних досліджень механізмів дії. Maternal-fetal medicine. PMID: 41608209