HTR-8/SVneo-celler - även känd som HTR-8/SV neo, HTR-8/SV-neo, HTR8/SVneo och HTR8svn – är en mycket använd mänsklig trofoblastcellinje som etablerades av Graham m.fl. 1993 [1]. Cellinjen skapades genom att man införde det stora T-antigenet från simianvirus 40 i humana trofoblaster från första trimestern, vilket gav cellerna en förlängd livslängd som vida översteg de 12–14 passager som är typiska för den ursprungliga HTR-8-linjen. Sedan de etablerades har HTR-8/SVneo-cellerna blivit en oumbärlig in vitro-modell för att studera trofoblastbiologin i moderkakan, inklusive cellinvasion, migration och proliferation. Forskare världen över förlitar sig på denna cellinje för att undersöka graviditetsstörningar såsom preeklampsi, graviditetsdiabetes och återkommande spontanaborter, samt för att utforska effekterna av miljögifter och farmakologiska ämnen på trofoblasternas funktion.

Viktiga slutsatser

• HTR-8/SVneo är en SV40-immortaliserad mänsklig trofoblastcellinje som härrör från placentavävnad från första trimestern (Cellosaurus-accessionsnummer: CVCL_7162).
• Cellinjen består av en blandad population av epiteliala, trofoblastliknande och mesenkymala/stromaliknande celler, vilket gör den till en modell för studier av epitel-till-mesenkym-övergång (EMT) [2].
• HTR-8/SVneo-celler används i stor utsträckning för att studera preeklampsi, graviditetsdiabetes, återkommande spontanaborter och intrahepatisk kolestas under graviditeten.
• Cellinjen uppvisar en nästan triploid karyotyp med intraklonal variation, ett kännetecken som är vanligt hos trofoblastcellinjer som odlats under lång tid [3].
• HTR-8/SVneo-cellerna ingår i ENCODE-projektets gemensamma celltyper (nivå 3) och det finns tillgängliga omikdata om DNA-metylering för dessa.
• Dussintals härledda knockout- och reporterlinjer har skapats, vilket visar på den breda användbarheten hos denna föräldracellinje inom funktionell genomik.

Vad är HTR-8/SVneo?

HTR-8/SVneo framställdes från mänskliga trofoblaster från placenta under första trimestern, som erhölls från en donator av okänt kön vid en graviditetsålder på 6–12 veckor. Ingen associerad sjukdom hos modern registrerades för donatorn. Cellerna immortaliserades genom transfektion med genen för det stora T-antigenet från simianvirus 40, vilket resulterade i en transformerad cellinje (CVCL_7162) med obegränsad proliferationsförmåga. [1]. Både den ursprungliga HTR-8-linjen och den därav härledda HTR-8/SVneo-linjen visade sig vara cytokeratinpositiva, vilket bekräftar att de är epiteliala trofoblaster. Den transfekterade linjen utsöndrar enbart humant koriongonadotropin, en egenskap som inte observerats hos de ursprungliga cellerna.

Vidare karakterisering visade att HTR-8/SVneo inte är en homogen trofoblastpopulation. Abou-Kheir och kollegor visade att linjen består av två olika cellpopulationer: en med epiteliala trofoblastkännetecken och en annan med mesenkymala eller stromala egenskaper [2]. Denna blandade population har betydelse för tolkningen av experimentella resultat, särskilt i invasions- och migrationsförsök. Cytogenomisk analys visade dessutom att HTR-8/SVneo har en nästan triploid karyotyp med inter- och intraklonala kromosomavvikelser som uppstått till följd av långvarig odling [3]. Molekylär profilering bekräftade att HTR-8/SVneo delar flera, men inte alla, markörer som är karakteristiska för subpopulationer av primära extravillösa trofoblaster [4].

HTR-8/SVneo — Odlingsinformation

Fördelar med HTR-8/SVneo-celler

HTR-8/SVneo-cellerna erbjuder flera övertygande fördelar för forskning om moderkakan och reproduktion. Immortaliseringen med SV40 ger cellinjen en stabil, förlängd livslängd som vida överstiger de 12–14 passager som kan uppnås med de ursprungliga HTR-8-cellerna [1]. Denna långa livslängd möjliggör storskaliga, reproducerbara experiment utan de logistiska utmaningarna som är förknippade med att skaffa färska primära trofoblaster. Cellerna behåller viktiga trofoblastmarkörer – däribland cytokeratinuttryck och utsöndring av humant koriongonadotropin – vilket ger ett biologiskt relevant sammanhang för mekanistiska studier av placentafunktionen.

Att denna cellinje reagerar på ett brett spektrum av experimentella ingrepp gör den särskilt mångsidig. Forskare har framgångsrikt använt RNA-interferens, plasmidiöuttryck, CRISPR-Cas9-knockout och farmakologiska behandlingar på HTR-8/SVneo-celler inom olika forskningsområden. [5] [6]. Cellerna reagerar på förväntat sätt på syrefattiga förhållanden, miljöer med hög glukoshalt och cytokinstimulering, och återspeglar på ett troget sätt olika aspekter av patologiska tillstånd, däribland preeklampsi och graviditetsdiabetes [7] [8]. Dessutom möjliggör en växande samling av härledda knockout-linjer målinriktad funktionell genomik utan att man behöver utveckla föräldralinjen från grunden.

Begränsningar hos HTR-8/SVneo-celler

Den största begränsningen hos HTR-8/SVneo är dess blandade cellpopulation. Karakteriseringsstudier har bekräftat att epiteliala trofoblastliknande celler och mesenkymala stromaliknande celler förekommer samtidigt i samma odling [2]. Denna heterogenitet försvårar tolkningen av experimentella observationer som hänförliga till en enda, definierad celltyp. Resultat som erhållits med hjälp av samlade populationer kan dölja subpopulationsspecifika reaktioner, och man måste vara försiktig när man extrapolerar resultaten till beteendet hos rena primära trofoblaster.

Den nästan triploida och aneuploida karyotypen hos HTR-8/SVneo utgör ytterligare en begränsning [3]. Kromosominstabilitet, som kan öka med antalet passager, kan förändra gendoseringen och därmed påverka signalvägarna. Dessutom, även om HTR-8/SVneo-celler delar flera molekylära markörer med primära extravillösa trofoblaster, återspeglar de inte fullt ut alla egenskaper hos någon enskild subpopulation av primära trofoblaster [4]. Forskare bör därför, i den mån det är möjligt, komplettera data från HTR-8/SVneo med validering på primära celler eller in vivo-modeller, särskilt när det gäller studier som rör differentiering eller endokrin funktion.

Användningsområden för HTR-8/SVneo-celler

Forskning om preeklampsi

Preeklampsi (PE) är en av de graviditetskomplikationer som studerats mest ingående med hjälp av HTR-8/SVneo-celler. Cellinjen fungerar som en lättanvänd in vitro-modell för hypoxiinducerad trofoblastdysfunktion, ett centralt inslag i PE:s patogenes. Fan och kollegor använde HTR-8/SVneo-celler odlade under hypoxiska förhållanden för att visa att östrogenreceptor α (ERα) transkriptionellt aktiverar ACSL4, vilket främjar ferroptos – en form av järnberoende celldöd – i trofoblaster i moderkakan. [9]. Genom att hämma ERα minskade markörerna för oxidativ stress och cellernas livskraft återställdes, vilket pekade på en ny terapeutisk strategi.

Med hjälp av denna modell har även epigenetiska och transkriptionella mekanismer vid PE klarlagts. Zhao och kollegor visade att SETD7-medierad H3K4me3-modifiering på LncRNA XIST-promotorn driver pyroptos i trofoblaster via en FOXA1/TMBIM4/GSDMD-N-axel i HTR-8/SVneo-celler som behandlats med hypoxi-reoxygenering [7]. I en separat studie fann Zhu och kollegor att PTPRN2 – som är uppreglerat i hypoxiska HTR-8/SVneo-celler – hämmar trofoblastinvasion genom att hämma Wnt/β-katenin-signalvägen, vilket kopplar samman onormal tyrosinfosfatas-signalering till ytlig placentation vid preeklampsi [10]. Wang och kollegor visade dessutom att transkriptionsfaktorn IRF1 reglerar PANoptos i hypoxiska HTR-8/SVneo-celler via HDAC1, vilket ger insikt i de multimodala celldödsvägarna som är verksamma vid PE [11].

CCN5 (WISP-2) har visat sig vara en ytterligare regulator av trofoblasternas beteende vid preeklampsi. Gong och kollegor rapporterade att överuttryck av CCN5 i HTR-8/SVneo-celler avsevärt hämmade proliferation, migration, invasion och epitel-mesenkym-övergång, medan nedreglering av CCN5 hade motsatta effekter [12]. Cheng och kollegor visade dessutom att TGFβ1 hämmar migration, invasion och proliferation hos HTR-8/SVneo-celler genom en vävnadstransglutaminas-medierad aktivering av TLR4/NF-κB-signalvägen, vilket utgör en mekanistisk koppling mellan placentafibros och trofoblastdysfunktion vid preeklampsi [13].

Graviditetsdiabetes och trofoblastdysfunktion

Graviditetsdiabetes (GDM) skapar en hyperglykemisk mikromiljö i moderkakan som försämrar trofoblastfunktionen. HTR-8/SVneo-celler som behandlats med höga glukoskoncentrationer återspeglar viktiga aspekter av den trofoblastskada som är förknippad med GDM. Lin och kollegor använde denna modell för att undersöka ferroptos i placentan vid GDM, genom att analysera ultrastruktur, bildning av reaktiva syreföreningar och järnansamling. De fann att metformin dämpade ferroptosmarkörerna både i HTR-8/SVneo-celler och i placentaprover från GDM-patienter, vilket tyder på en skyddande verkan hos detta antidiabetiska läkemedel. [14].

Zhang och kollegor identifierade neurotrofin-4 (NTF4) som en faktor associerad med graviditetsdiabetes (GDM) som uppvisade ökad uttrycksnivå i placentavävnad från drabbade patienter. I HTR-8/SVneo-celler som utsattes för hög glukos minskade inaktiveringen av NTF4 apoptosen och utsöndringen av inflammatoriska cytokiner samtidigt som cellernas förmåga till celldelning återställdes. Dessa effekter förmedlades via PI3K/AKT-signalvägen, vilket pekar på NTF4 som en potentiell terapeutisk målmolekyl vid GDM-relaterad placentadysfunktion. [8]. Dessutom visade Yu och kollegor att nivån av miR-320a i serum är förhöjd hos patienter med graviditetsdiabetes och att det direkt påverkar ett viktigt regulatoriskt gen i HTR-8/SVneo-celler, vilket hämmar celltillväxten och främjar apoptos. Detta mikro-RNA hade även ett prediktivt värde för makrosomi hos fostret, vilket kopplar samman molekylära förändringar på trofoblastnivå med ogynnsamma utfall hos nyfödda [15].

Återkommande spontana aborter och missfall

HTR-8/SVneo-celler är ett värdefullt verktyg för att studera återkommande spontanabort (RSA) och relaterad trofoblastdysfunktion. Huang och kollegor inducerade ferroptos i HTR-8/SVneo-celler med hjälp av erastin för att modellera RSA-associerad trofoblastskada. De fann att den traditionella kinesiska läkemedelsblandningen Anzi Tiaochong Tang hämmade ferroptos via METTL14/m6A/SLC39A14-axeln, vilket minskade järnansamlingen och den oxidativa stressen. Denna studie visade hur m6A-RNA-metylering reglerar järnmetabolismen i trofoblaster och identifierade en potentiell behandlingsstrategi för RSA. [16].

Ye och Deng undersökte ytterligare vilken roll den epitranskriptomiska omprogrammeringen av N6-metyladenosin (m6A) spelar för trofoblasternas livskraft. De visade att METTL14 främjar dysfunktion hos trofoblasterna genom att öka uttrycket av SZRD1 på ett m6A-beroende sätt i HTR-8/SVneo-celler. Förhöjda SZRD1-nivåer hämmade proliferation, migration, invasion och angiogenes, vilket speglar den ytliga trofoblastinvasionen som är karakteristisk för preeklampsi och tidigt graviditetsbortfall [17]. Sammantaget visar dessa studier att HTR-8/SVneo-celler utgör en användbar plattform för att kartlägga epitranskriptomisk reglering inom reproduktiv patologi.

Trofoblastinvasion regleras också av mikro-RNA som är aktiva under den tidiga placentabildningen. Arora och kollegor använde HTR-8/SVneo-celler för att visa att miR-22-3p riktar sig mot Sp1, vilket därigenom minskar uttrycket av cystationin-β-syntas och dämpar aktiviteten hos MMP-2 och MMP-9. Denna kaskad begränsar trofoblastens invasionsförmåga och kan bidra till placentationsdefekter som ligger till grund för tidig preeklampsi och andra negativa utfall. [18].

Miljötoxikologi och reproduktiv säkerhet

HTR-8/SVneo-celler har visat sig vara mycket lämpliga för att utvärdera reproduktionstoxicitet hos miljöföroreningar och farmakologiska ämnen. Zhang och kollegor undersökte däckantioxidanten 6PPD och visade att exponering för höga doser inducerade cellulär senescens i HTR-8/SVneo-celler genom att hämma BAZ1B-medierad ubiquitinering och nedbrytning av p21. Detta åldringsprogram försämrade trofoblastfunktionen och var förknippat med oförklarade missfall i en klinisk fall-kontrollstudie, vilket fastställde ett mekanistiskt samband mellan föroreningar från däck och missfall. [19].

Liu och kollegor undersökte de farmakologiska säkerhetsaspekterna och använde HTR-8/SVneo-celler för att kartlägga mekanismen bakom den reproduktionstoxicitet som orsakas av triptolid. En integrerad MeRIP-seq- och mRNA-seq-analys visade att triptolid – den aktiva beståndsdelen i Tripterygium wilfordii – i stor utsträckning omprogrammerade m6A-epitranskriptomet, vilket förändrade uttrycket av över 1 700 gener och orsakade skador på trofoblastcellerna. [6]. Hu och kollegor visade dessutom att en minskning av glutation i HTR-8/SVneo-celler leder till ökade halter av reaktiva syreföreningar, orsakar DNA-skador och aktiverar den inflammatoriska cGAS-STING-signalvägen – en mekanism som är relevant för oxidativ skada på moderkakan till följd av miljöexponeringar [5].

Studier inom ramen för graviditetsrelaterad leversjukdom visar ytterligare på mångsidigheten hos HTR-8/SVneo-celler. Xu och kollegor använde cellinjen i kombination med rumslig metabolomik för att undersöka hur ansamling av gallsyror vid intrahepatisk kolestas under graviditeten (ICP) driver på trofoblastapoptos genom en omprogrammering av glycerofosfolipidmetabolismen [20]. Liu och kollegor validerade separat de skyddande effekterna av den traditionella kinesiska medicinen Yinzhihuang i form av oral vätska på taurokolinsyra-inducerade HTR-8/SVneo-celler och visade därmed dess förmåga att återställa trofoblasternas livskraft under kolestatiska förhållanden [21].

Slutsats

HTR-8/SVneo-celler är fortfarande en av de mest produktiva och mest använda modellerna för humana trofoblaster inom reproduktionsbiologin. Från att belysa mekanismerna bakom preeklampsi, graviditetsdiabetes och spontanabort till att utvärdera reproduktionsriskerna med miljöföroreningar och läkemedel har cellinjen visat sig vara av stor nytta inom en rad olika forskningssammanhang. Dess reaktionsförmåga på hypoxi, hyperglykemi och epigenetisk manipulation – i kombination med tillgången till ett växande utbud av härledda knockout-linjer – säkerställer att HTR-8/SVneo-celler även i fortsättningen kommer att ge grundläggande insikter i placentans fysiologi och patologi. Forskare som söker en välkarakteriserad, biologiskt relevant trofoblastmodell kommer att finna HTR-8/SVneo-cellerna ett oumbärligt verktyg. För att köpa HTR-8/SVneo-celler eller ställa en förfrågan, besök cytion.com.

Viktiga publikationer

1. Graham CH, Hawley TS, Hawley RG, MacDougall JR, Kerbel RS, Khoo N, Lala PK (1993) Etablering och karakterisering av humana trofoblastceller från första trimestern med förlängd livslängd. Experimental Cell Research. PMID: 7684692
2. Abou-Kheir W, Barrak J, Hadadeh O, Daoud G (2017) Cellinjen HTR-8/SVneo består av en blandad cellpopulation. Placenta. PMID: 28161053
3. Weber M, Weise A, Vasheghani F (2021) Cytogenomik hos sex humana trofoblastcellinjer. Placenta. PMID: 33096371
4. Pastuschek J, Nonn O, Gutiérrez-Samudio RN (2021) Molekylära egenskaper hos etablerade cellinjer härledda från trofoblaster. Placenta. PMID: 33810901
5. Hu S, Liu W, Dong Y (2026) Minskning av glutation aktiverar cGAS-STING-signalvägen via oxidativ stress vid preeklampsi. Molecular Immunology. PMID: 42068604
6. Liu X, Wu Y, Tian J (2026) Omprogrammeringen av m(6)A-epitranskriptomet ligger bakom den triptolidinducerade reproduktionstoxiciteten i HTR-8/SVneo-celler. Toxics. PMID: 42043161
7. Zhao X, Li L, Wang Y (2026) SETD7-medierad epigenetisk reglering av LncRNA XIST främjar pyroptos i trofoblaster: en studie på mus- och cellmodeller för preeklampsi. Biology Direct. PMID: 42177518
8. Zhang L, Yang J (2026) Hämning av NTF4 dämpar högglukosinducerad apoptos och inflammation i HTR-8/SVneo-celler via PI3K/AKT-signalvägen. Immunity, inflammation and disease. PMID: 42036822
9. Fan X, Yang Y, Zhu X (2026) ERα underlättar hypoxiinducerad ferroptos i trofoblaster i moderkakan genom att transkriptionellt aktivera ACSL4. American Journal of Reproductive Immunology. PMID: 42160036
10. Zhu T, Zeng WJ, Zhang Y (2026) Hypoxiinducerat PTPRN2 hämmar trofoblastinvasion genom hämning av Wnt/β-katenin-signalvägen. Current medical science. PMID: 42154150
11. Wang Z, Cheng L, Li G (2026) Transkriptionsfaktorn IRF1 påverkar HDAC1 och PANoptos för att reglera utvecklingen av preeklampsi. Biology Direct. PMID: 42035194
12. Gong Y, Li J, Wang C (2026) Överuttryck av CCN5 hämmar proliferation, migration, invasion och epitel-mesenkym-övergång hos trofoblastceller av typen HTR-8/SVneo. European Journal of Pharmacology. PMID: 42178008
13. Cheng M, Di X, Chen Q (2026) TGFβ1 hämmar migration, invasion och proliferation av HTR-8/Svneo-celler via den tTG-aktiverade TLR4/NF-κB-signalvägen. Journal of biochemical and molecular toxicology. PMID: 42008735
14. Lin Q, Qin X, Shen M (2026) Metformin och ferroptos i moderkakan vid graviditetsdiabetes: En mekanistisk studie. Journal of diabetes research. PMID: 42237524
15. Yu R, Liu X, Zhang S (2026) Identifiering av miR-320a i serum vid graviditetsdiabetes för att förutsäga makrosomi samt mekanistisk undersökning in vitro. BMC Medical Genomics. PMID: 42210203
16. Huang S, Yu M, Luo Y (2026) Anzi Tiaochong Tang hämmar ferroptos i trofoblaster via METTL14/m6A/SLC39A14-axeln vid återkommande spontanaborter. Frontiers in pharmacology. PMID: 42137328
17. Ye Q, Deng L (2026) METTL14 främjar dysfunktion hos trofoblaster genom att öka uttrycket av SZRD1 på ett m6A-beroende sätt. Human Cell. PMID: 42133253
18. Arora P, Kalra S, Dhingra R (2025) MikroRNA-22 (miR-22) reglerar trofoblastcellernas invasion via signalvägen Specificity Protein 1 (Sp1)/cystationin-β-syntas (CBS)/matrismetalloproteinaser 2 och 9 (MMP-2 och MMP-9). Cureus. PMID: 41583211
19. Zhang W, Liang Y, Sun Y (2026) Exponering för höga doser av däckantioxidanten 6PPD leder till att åldrande orsakar oförklarliga missfall genom att hämma den BAZ1B-medierade ubiquitinationsnedbrytningen av P21. EBioMedicine. PMID: 42224779
20. Xu ZT, Ge LX, Luo L (2026) Ansamling av PIP(2) i spongiotrofoblasten driver trofoblastapoptos vid intrahepatisk kolestas under graviditeten. Molecular reproduction and development. PMID: 42017405
21. Liu T, Zhuang X, Gu W (2025) Yinzhihuang oral vätska lindrar intrahepatisk kolestas under graviditeten: integrerad bioinformatik och experimentella mekanistiska insikter. Maternal-fetal medicine. PMID: 41608209