Ga naar de inhoud
L-428 Cellen
Weefsel
Pleurale effusie
Ziekte
Hodgkinlymfoom
Synoniemen
L-428, L 428

Documenten

L-428 Cellen

Cell line · Productnummer 300200

De L428-cellijn is een algemeen erkende neoplastische cellijn die is afgeleid van de pleurale effusie van een vrouwelijke patiënt bij wie de ziekte van Hodgkin was vastgesteld...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De L428-cellijn is een beproefde neoplastische cellijn afkomstig van de pleurale effusie van een vrouwelijke patiënt bij wie de ziekte van Hodgkin van het nodulaire scleroserende type werd vastgesteld. De oprichting van deze cellijn heeft een waardevol model opgeleverd voor het bestuderen van de cellulaire kenmerken en moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan het Hodgkin-lymfoom. L428 cellen lijken sterk op de Reed-Sternberg (RS) en Hodgkin (H) cellen, die kenmerkend zijn voor Hodgkin lymfoom. Deze cellen vertonen een uniek fenotype dat verschilt van typische B-cellen, T-cellen en andere hematopoëtische celtypen, wat bijdraagt aan de voortdurende discussie over de exacte cellulaire oorsprong van RS- en H-cellen.

De L428 cellijn vertoont verschillende onderscheidende kenmerken, waaronder aneuploïdie en de aanwezigheid van meerdere structurele en numerieke chromosomale afwijkingen, wat typische markers zijn van de neoplastische aard. Deze cellen missen oppervlakte- of cytoplasmatische immunoglobulines (Igs), ondanks dat ze afkomstig zijn van een lymfoïde maligniteit, wat duidt op een significante differentiatie van normale lymfoïde cellen. De afwezigheid van Epstein-Barr Virus (EBV)-antigenen, zoals EBNA en VCA, onderscheidt L428 verder van andere EBV-positieve Hodgkin-lymfoomcellijnen. De cellen hebben ook geen lysozym, peroxidase en chlooracetaatesteraseactiviteit, waardoor ze zich nog meer onderscheiden van myeloïde cellen, monocyten of macrofagen.

Qua morfologie vertonen L428-cellen verschillende groottes, van kleine mononucleaire cellen tot grote multinucleaire cellen, waarbij sommige cellen villusvormige projecties op hun membraan vertonen. De cellen vallen ook op door hun grote, vaak niervormige nucleoli. Functioneel gezien brengen L428-cellen Ia-achtige antigenen en T-celreceptoren tot expressie, maar zijn ze verstoken van andere veelvoorkomende lymfoïde en myeloïde markers. Dit unieke immunofenotype, gecombineerd met de chromosomale en morfologische kenmerken, ondersteunt de classificatie van L428 als een model van Hodgkinlymfoom, met name voor het bestuderen van de biologie van RS- en H-cellen.

De L428-cellijn is uitgebreid gebruikt in onderzoek naar de pathogenese van de ziekte van Hodgkin en om potentiële therapeutische doelwitten te onderzoeken. Het vermogen om te prolifereren in vitro en de unieke eigenschappen maken het een kritische bron voor het bevorderen van het begrip van deze complexe hematologische maligniteit.

Weefsel
Pleurale effusie
Ziekte
Hodgkinlymfoom
Synoniemen
  • L-428
  • L 428

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Ronde cellen
Celtype
Lymfoblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
L428 (Cytion catalogusnummer 300200)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1361

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 1 mM natriumpyruvaat, 1% NEAA
Heruitplanten
Onderhoud de culturen door het medium periodiek toe te voegen of te vervangen. Start de culturen met een dichtheid van 5 x 105 cellen/ml en houd de celconcentratie binnen het bereik van 3 x 105 tot 1 x 106 cellen/ml voor een optimale groei.
Zaaidichtheid
1 x 105 cellen/ml
Vloeistofverversing
Om de 3 dagen
Herstel na ontdooiing
Snel
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
37 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch