Gå direkte til indholdet
L-428-celler
Væv
Pleural effusion
Sygdom
Hodgkin-lymfom
Synonymer
L-428, L 428

Dokumenter

L-428-celler

Cell line · Varenummer 300200

L428-cellelinjen er en veletableret neoplastisk cellelinje, der stammer fra pleuralvæske fra en kvindelig patient, der var blevet diagnosticeret med Hodgkins sygdom i...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

L428-cellelinjen er en veletableret neoplastisk cellelinje, der stammer fra pleuraeffusionen fra en kvindelig patient, der blev diagnosticeret med Hodgkins sygdom af den nodulære skleroserende type. Etableringen af denne cellelinje har givet en værdifuld model til undersøgelse af de cellulære egenskaber og molekylære mekanismer, der ligger til grund for Hodgkins lymfom. L428-cellerne minder meget om Reed-Sternberg (RS)- og Hodgkin (H)-cellerne, som er kendetegnende for Hodgkins lymfom. Disse celler udviser en unik fænotype, der adskiller sig fra typiske B-celler, T-celler og andre hæmatopoietiske celletyper, hvilket bidrager til den igangværende debat om RS- og H-cellernes nøjagtige cellulære oprindelse.

L428-cellelinjen udviser flere karakteristiske egenskaber, herunder aneuploidi og tilstedeværelsen af flere strukturelle og numeriske kromosomale abnormiteter, som er typiske markører for dens neoplastiske natur. Disse celler mangler overflade- eller cytoplasmatiske immunoglobuliner (Igs) på trods af, at de stammer fra en lymfoid malignitet, hvilket tyder på en betydelig differentiering fra normale lymfoide celler. Fraværet af Epstein-Barr Virus (EBV)-antigener, såsom EBNA og VCA, adskiller yderligere L428 fra andre EBV-positive Hodgkins lymfom-cellelinjer. Cellerne mangler også lysozym-, peroxidase- og kloracetatesteraseaktivitet, hvilket forstærker deres forskel fra myeloide celler, monocytter eller makrofager.

Med hensyn til morfologi udviser L428-celler en række forskellige størrelser, fra små mononukleære celler til store multinukleære celler, hvor nogle celler viser villøse fremspring på deres membraner. Cellerne er også bemærkelsesværdige på grund af deres store, ofte nyreformede nucleoli. Funktionelt udtrykker L428-celler Ia-lignende antigener og T-cellereceptorer, men er blottet for andre almindelige lymfoide og myeloide markører. Denne unikke immunfænotype kombineret med de kromosomale og morfologiske træk understøtter klassificeringen af L428 som en model for Hodgkins lymfom, især til undersøgelse af RS- og H-cellers biologi.

L428-cellelinjen er blevet brugt flittigt i forskningen til at udforske patogenesen af Hodgkins sygdom og til at undersøge potentielle terapeutiske mål. Dens evne til at sprede sig in vitro og dens unikke egenskaber gør den til en vigtig ressource for at fremme forståelsen af denne komplekse hæmatologiske malignitet.

Væv
Pleural effusion
Sygdom
Hodgkin-lymfom
Synonymer
  • L-428
  • L 428

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Runde celler
Celletype
Lymfoblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
L428 (Cytion katalognummer 300200)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1361

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS, 1 mM natriumpyruvat, 1% NEAA
Oddyrkning
Vedligehold kulturerne ved regelmæssigt at tilføje eller udskifte mediet. Start kulturerne med en tæthed på 5 x 105 celler/ml og hold cellekoncentrationen inden for området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vækst.
Såtæthed
1 x 105 celler/ml
Væskeudskiftning
Hver 3. dag
Genopretning efter optøning
Hurtig
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
37 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk