L-428 Celler

L428-cellelinjen er en veletablert neoplastisk cellelinje som stammer fra pleuraeffusjonen til en kvinnelig pasient som fikk diagnosen Hodgkins sykdom av nodulær skleroserende type. Etableringen av denne cellelinjen har gitt oss en verdifull modell for å studere de cellulære egenskapene og molekylære mekanismene som ligger til grunn for Hodgkins lymfom. L428-celler ligner Reed-Sternberg (RS)- og Hodgkin (H)-celler, som er kjennetegnende celler ved Hodgkins lymfom. Disse cellene har en unik fenotype som skiller seg fra typiske B-celler, T-celler og andre hematopoietiske celletyper, noe som har bidratt til den pågående debatten om RS- og H-cellenes eksakte cellulære opprinnelse.

L428-cellelinjen har flere særegne kjennetegn, blant annet aneuploidi og tilstedeværelse av flere strukturelle og numeriske kromosomavvik, som er typiske markører for dens neoplastiske natur. Disse cellene mangler overflate- eller cytoplasmatiske immunglobuliner (Igs), til tross for at de stammer fra en lymfoid malignitet, noe som tyder på en betydelig differensiering fra normale lymfoide celler. Fraværet av Epstein-Barr-virus (EBV)-antigener, som EBNA og VCA, skiller L428 ytterligere fra andre EBV-positive Hodgkins lymfomcellelinjer. Cellene mangler også lysozym-, peroksidase- og kloracetatesteraseaktivitet, noe som forsterker skillet fra myeloide celler, monocytter eller makrofager.

Morfologisk varierer L428-cellene i størrelse, fra små mononukleære celler til store flerkjernede celler, og noen av cellene har villøse utvekster på membranen. Cellene er også kjennetegnet av store, ofte nyreformede nukleoler. Funksjonelt uttrykker L428-celler Ia-lignende antigener og T-cellereseptorer, men mangler andre vanlige lymfoide og myeloide markører. Denne unike immunfenotypen, kombinert med de kromosomale og morfologiske trekkene, støtter klassifiseringen av L428 som en modell for Hodgkins lymfom, spesielt for studier av RS- og H-cellenes biologi.

L428-cellelinjen har blitt brukt i utstrakt grad i forskning for å utforske patogenesen ved Hodgkins sykdom og for å undersøke potensielle terapeutiske mål. Cellelinjens evne til å spre seg in vitro og dens unike egenskaper gjør den til en viktig ressurs for å øke forståelsen av denne komplekse hematologiske maligniteten.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring