Pāriet uz saturu
L-428 Šūnas
Audums
Pleiras izsvīdums
Slimība
Hodžkina limfoma
Sinonīmi
L-428, L 428

Dokumenti

L-428 Šūnas

Cell line · Preces numurs 300200

L428 šūnu līnija ir labi izpētīta neoplastiska šūnu līnija, kas iegūta no pleiras izdalījumiem sievietei, kurai diagnosticēta Hodžkina slimība...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

L428 šūnu līnija ir vispāratzīta neoplastisko šūnu līnija, kas iegūta no pleiras izplūduma, kas iegūts no pacientes, kurai diagnosticēta Hodžkina mezglaini sklerozējošā tipa slimība. Šīs šūnu līnijas izveide ir nodrošinājusi vērtīgu modeli Hodžkina limfomas pamatā esošo šūnu īpašību un molekulāro mehānismu izpētei. L428 šūnas ir ļoti līdzīgas Rīda-Sternberga (RS) un Hodžkina (H) šūnām, kas ir Hodžkina limfomas raksturīgās šūnas. Šīm šūnām piemīt unikāls fenotips, kas atšķiras no tipiskām B šūnām, T šūnām un citiem hematopoētisko šūnu tipiem, tādējādi veicinot pašreizējās diskusijas par RS un H šūnu precīzu šūnu izcelsmi.

L428 šūnu līnijai piemīt vairākas īpatnības, tostarp aneuploīdija un daudzu strukturālu un skaitlisku hromosomu anomāliju klātbūtne, kas ir tipiski tās neoplastiskās dabas marķieri. Šīm šūnām nav virsmas vai citoplazmas imūnglobulīnu (Igs), lai gan tās ir iegūtas no limfoīdiem ļaundabīgiem audzējiem, kas liecina par būtisku diferenciāciju no normālām limfoīdām šūnām. Epšteina-Barra vīrusa (EBV) antigēnu, piemēram, EBNA un VCA, neesamība vēl vairāk atšķir L428 no citām EBV pozitīvām Hodžkina limfomas šūnu līnijām. Šūnām trūkst arī lizocīma, peroksidāzes un hloracetāta esterāzes aktivitātes, kas pastiprina to atšķirību no mieloīdām šūnām, monocītiem vai makrofāgiem.

Morfoloģiski L428 šūnas ir dažāda lieluma - no mazām vienšūnu šūnām līdz lielām daudzkodolu šūnām, un dažām šūnām uz membrānām ir redzami plēvveida izvirzījumi. Šīm šūnām raksturīgi arī lieli, bieži vien nierveida kodoli. Funkcionāli L428 šūnas ekspresē Ia līdzīgus antigēnus un T-šūnu receptorus, bet tām nav citu parasto limfoīdu un mieloīdu marķieru. Šis unikālais imunofenotips kopā ar hromosomālajām un morfoloģiskajām īpašībām atbalsta L428 klasificēšanu par Hodžkina limfomas modeli, jo īpaši RS un H šūnu bioloģijas izpētei.

L428 šūnu līnija ir plaši izmantota pētījumos, lai izpētītu Hodžkina slimības patoģenēzi un izpētītu potenciālos terapeitiskos mērķus. Tās spēja proliferēt in vitro un unikālās īpašības padara to par ļoti svarīgu resursu, lai uzlabotu izpratni par šo sarežģīto hematoloģisko ļaundabīgo slimību.

Audums
Pleiras izsvīdums
Slimība
Hodžkina limfoma
Sinonīmi
  • L-428
  • L 428

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Apaļas šūnas
Šūnu tips
Limfoblasts

04Identifikatori

Atsauce
L428 (Cytion kataloga numurs 300200)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1361

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS, 1 mM nātrija piruvātu, 1% NEAA
Pārstādīšana
Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
Sēšanas blīvums
1 x 105 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Fast
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
37 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis