Prejsť na obsah
L-428 Bunky
Tkanivo
Pleurálny výpotok
Choroba
Hodgkinov lymfóm
Synonymá
L-428, L 428

Dokumenty

L-428 Bunky

Cell line · Číslo výrobku 300200

Bunka L428 je dobre známa neoplastická bunková línia odvodená z pleurálneho výpotku pacientky s diagnózou Hodgkinovej choroby...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia L428 je dobre známa neoplastická bunková línia získaná z pleurálneho výpotku pacientky s diagnózou Hodgkinovej choroby nodulárneho sklerotizujúceho typu. Vytvorenie tejto bunkovej línie poskytlo cenný model na štúdium bunkových charakteristík a molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom Hodgkinovho lymfómu. Bunky L428 sa veľmi podobajú Reed-Sternbergovým (RS) a Hodgkinovým (H) bunkám, ktoré sú charakteristickými bunkami Hodgkinovho lymfómu. Tieto bunky vykazujú jedinečný fenotyp odlišný od typických B-buniek, T-buniek a iných typov krvotvorných buniek, čo prispieva k prebiehajúcim diskusiám o presnom bunkovom pôvode RS a H-buniek.

Bunková línia L428 vykazuje niekoľko charakteristických znakov vrátane aneuploidie a prítomnosti viacerých štrukturálnych a numerických chromozómových abnormalít, ktoré sú typickými znakmi jej neoplastickej povahy. Tieto bunky nemajú povrchové ani cytoplazmatické imunoglobulíny (Igs) napriek tomu, že pochádzajú z lymfoidnej malignity, čo naznačuje výraznú diferenciáciu od normálnych lymfoidných buniek. Absencia antigénov vírusu Epsteina-Barrovej (EBV), ako sú EBNA a VCA, ďalej odlišuje L428 od iných bunkových línií Hodgkinovho lymfómu pozitívnych na EBV. Bunky tiež nemajú aktivitu lyzozýmu, peroxidázy a chloracetátesterázy, čo posilňuje ich odlišnosť od myeloidných buniek, monocytov alebo makrofágov.

Z morfologického hľadiska vykazujú bunky L428 rôznu veľkosť, od malých mononukleárnych buniek až po veľké viacjadrové bunky, pričom niektoré bunky majú na membráne vilózne výčnelky. Bunky sa vyznačujú aj veľkými, často obličkovitými jadrami. Funkčne bunky L428 exprimujú antigény podobné Ia a receptory T-buniek, ale nemajú iné bežné lymfoidné a myeloidné markery. Tento jedinečný imunofenotyp spolu s chromozomálnymi a morfologickými znakmi podporuje klasifikáciu L428 ako modelu Hodgkinovho lymfómu, najmä na štúdium biológie RS a H buniek.

Bunková línia L428 sa vo veľkej miere používa vo výskume na skúmanie patogenézy Hodgkinovej choroby a na skúmanie potenciálnych terapeutických cieľov. Jej schopnosť proliferácie in vitro a jedinečné vlastnosti z nej robia dôležitý zdroj pre ďalšie pochopenie tejto komplexnej hematologickej malignity.

Tkanivo
Pleurálny výpotok
Choroba
Hodgkinov lymfóm
Synonymá
  • L-428
  • L 428

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Okrúhle bunky
Typ bunky
Lymfoblast

04Identifikátory

Citácia
L428 (katalógové číslo Cytion 300200)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1361

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS, 1 mM pyruvát sodný, 1% NEAA
Rozmnožovanie kultúr
Kultúry udržiavajte pravidelným pridávaním alebo výmenou média. Kultúry začnite s hustotou 5 x 105 buniek/ml a pre optimálny rast udržujte koncentráciu buniek v rozmedzí 3 x 105 až 1 x 106 buniek/ml.
Hustota výsevu
1 x 105 buniek/ml
Obnova kvapaliny
Každé 3 dni
Zotavenie po rozmrazení
Rýchle
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
37 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský