L-428 Buňky

Buněčná linie L428 je dobře zavedená neoplastická buněčná linie získaná z pleurálního výpotku pacientky s diagnózou Hodgkinovy choroby nodulárního sklerotizujícího typu. Vytvoření této buněčné linie poskytlo cenný model pro studium buněčných charakteristik a molekulárních mechanismů, které jsou základem Hodgkinova lymfomu. Buňky L428 se velmi podobají Reed-Sternbergovým (RS) a Hodgkinovým (H) buňkám, které jsou charakteristickými buňkami Hodgkinova lymfomu. Tyto buňky vykazují jedinečný fenotyp odlišný od typických B-buněk, T-buněk a dalších typů hematopoetických buněk, což přispívá k probíhajícím diskusím o přesném buněčném původu RS a H-buněk.

Buněčná linie L428 vykazuje několik charakteristických znaků, včetně aneuploidie a přítomnosti četných strukturálních a numerických chromozomálních abnormalit, které jsou typickými znaky její neoplastické povahy. Tyto buňky postrádají povrchové nebo cytoplazmatické imunoglobuliny (Igs), přestože pocházejí z lymfoidní malignity, což naznačuje významnou diferenciaci od normálních lymfoidních buněk. Nepřítomnost antigenů viru Epsteina-Barrové (EBV), jako jsou EBNA a VCA, dále odlišuje L428 od ostatních buněčných linií Hodgkinova lymfomu pozitivních na EBV. Buňky také postrádají aktivitu lysozymu, peroxidázy a chloracetátesterázy, což posiluje jejich odlišení od myeloidních buněk, monocytů nebo makrofágů.

Z hlediska morfologie vykazují buňky L428 různé velikosti, od malých mononukleárních buněk až po velké vícejaderné buňky, přičemž některé buňky mají na membráně vilózní výběžky. Buňky jsou také nápadné svými velkými, často ledvinovitými jádry. Funkčně buňky L428 exprimují antigeny podobné Ia a T-buněčné receptory, ale postrádají další běžné lymfoidní a myeloidní markery. Tento jedinečný imunofenotyp spolu s chromozomálními a morfologickými znaky podporuje klasifikaci L428 jako modelu Hodgkinova lymfomu, zejména pro studium biologie RS a H buněk.

Buněčná linie L428 byla hojně využívána ve výzkumu ke zkoumání patogeneze Hodgkinovy choroby a ke zkoumání potenciálních terapeutických cílů. Její schopnost proliferace in vitro a její jedinečné vlastnosti z ní činí zásadní zdroj informací pro lepší pochopení této složité hematologické malignity.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení