Gå direkt till innehållet
L-428-celler
Vävnad
Pleurautgjutning
Sjukdom
Hodgkins lymfom
Synonymer
L-428, L 428

L-428-celler

Cell line · Produktnummer 300200

Cellinjen L428 är en väletablerad neoplastisk cellinje som härrör från pleurautgjutningen hos en kvinnlig patient som diagnostiserats med Hodgkins sjukdom i...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen L428 är en väletablerad neoplastisk cellinje som härrör från pleurautgjutningen hos en kvinnlig patient som diagnostiserats med Hodgkins sjukdom av nodulär skleroserande typ. Etableringen av denna cellinje har gett en värdefull modell för att studera de cellulära egenskaper och molekylära mekanismer som ligger bakom Hodgkins lymfom. L428-cellerna är mycket lika Reed-Sternberg- (RS) och Hodgkin- (H) cellerna, som är kännetecken för Hodgkins lymfom. Dessa celler uppvisar en unik fenotyp som skiljer sig från typiska B-celler, T-celler och andra hematopoetiska celltyper, vilket bidrar till pågående debatter om det exakta cellulära ursprunget för RS- och H-celler.

Cellinjen L428 uppvisar flera utmärkande egenskaper, bland annat aneuploidi och förekomst av flera strukturella och numeriska kromosomavvikelser, vilket är typiska markörer för dess neoplastiska natur. Dessa celler saknar immunoglobuliner (Igs) på ytan eller i cytoplasman, trots att de härrör från en lymfoid malignitet, vilket tyder på en betydande differentiering från normala lymfoida celler. Avsaknaden av antigener från Epstein-Barr-virus (EBV), såsom EBNA och VCA, skiljer ytterligare L428 från andra EBV-positiva cellinjer för Hodgkins lymfom. Cellerna saknar också lysozym-, peroxidas- och kloracetatesterasaktivitet, vilket förstärker deras skillnad från myeloida celler, monocyter eller makrofager.

Morfologiskt uppvisar L428-cellerna en rad olika storlekar, från små mononukleära celler till stora flerkärniga celler, där vissa celler uppvisar villösa utskott på sina membran. Cellerna utmärker sig också för sina stora, ofta njurformade nukleoler. Funktionellt uttrycker L428-cellerna Ia-liknande antigener och T-cellsreceptorer, men saknar andra vanliga lymfoida och myeloida markörer. Denna unika immunofenotyp, i kombination med de kromosomala och morfologiska egenskaperna, stöder klassificeringen av L428 som en modell för Hodgkins lymfom, särskilt för studier av RS- och H-cellernas biologi.

Cellinjen L428 har använts flitigt inom forskningen för att utforska patogenesen för Hodgkins sjukdom och för att undersöka potentiella terapeutiska mål. Dess förmåga att proliferera in vitro och dess unika egenskaper gör den till en viktig resurs för att öka förståelsen för denna komplexa hematologiska malignitet.

Vävnad
Pleurautgjutning
Sjukdom
Hodgkins lymfom
Synonymer
  • L-428
  • L 428

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Upphängning
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Runda celler
Celltyp
Lymfoblast

04Identifierare

Källa
L428 (Cytion katalognummer 300200)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1361

05Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS, 1 mM natriumpyruvat, 1% NEAA
Vidareodling
Underhåll odlingarna genom att regelbundet tillsätta eller byta ut odlingsmediet. Starta odlingarna med en densitet på 5 x 105 celler/ml och håll cellkoncentrationen inom intervallet 3 x 105 till 1 x 106 celler/ml för optimal tillväxt.
Såtäthet
1 x 105 celler/ml
Vätskeförnyelse
Var 3:e dag
Återhämtning efter upptining
Snabb
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
37 år
Etnicitet
Kaukasisk