Mine otse sisu juurde
L-428 rakud
Kude
Pleuraefusioon
Haigus
Hodgkini lümfoom
Sünonüümid
L-428, L 428

Dokumendid

L-428 rakud

Cell line · Toote number 300200

L428 rakuliin on hästi tuntud neoplastiline rakuliin, mis on saadud naispatsiendi pleuraefusioonist, kellel diagnoositi Hodgkini tõbi...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

L428 rakuliin on hästi tõestatud neoplastiline rakuliin, mis on saadud naissoost patsiendi pleuraefusioonist, kellel on diagnoositud Hodgkini nodulaarse skleroseeriva tüübi haigus. Selle rakuliini loomine on andnud väärtusliku mudeli Hodgkini lümfoomi rakuliste omaduste ja molekulaarmehhanismide uurimiseks. L428 rakud sarnanevad suurel määral Reed-Sternbergi (RS) ja Hodgkini (H) rakkudele, mis on Hodgkini lümfoomi iseloomulikud rakud. Need rakud näitavad ainulaadset fenotüüpi, mis erineb tüüpilistest B-rakkudest, T-rakkudest ja muudest vereloome rakutüüpidest, mis aitab kaasa käimasolevatele aruteludele RS- ja H-rakkude täpse rakulise päritolu üle.

L428 rakuliinil on mitmeid eripäraseid tunnuseid, sealhulgas aneuploidsus ja mitmete struktuuriliste ja numbriliste kromosoomianomaaliate esinemine, mis on selle neoplastilise iseloomu tüüpilised markerid. Nendel rakkudel puuduvad pinna- või tsütoplasmaimmunoglobuliinid (Igs), hoolimata sellest, et nad on pärit maliigsetest lümfirakkudest, mis viitab nende olulisele diferentseerumisele normaalsetest lümfirakkudest. Epstein-Barri viiruse (EBV) antigeenide, nagu EBNA ja VCA, puudumine eristab L428 täiendavalt teistest EBV-positiivsetest Hodgkini lümfoomi rakuliinidest. Rakkudel puudub ka lüsosüümi, peroksidaasi ja kloratsetaatesteraasi aktiivsus, mis tugevdab nende eristamist müeloidsetest rakkudest, monotsüütidest või makrofaagidest.

Morfoloogiliselt on L428 rakud erineva suurusega, alates väikestest mononukleaarsetest rakkudest kuni suurte mitmetuumaliste rakkudeni, kusjuures mõnel rakul on membraanil villoosseid vohamisi. Rakud paistavad silma ka suurte, sageli neerukujuliste nukleoolide poolest. Funktsionaalselt väljendavad L428 rakud Ia-taolisi antigeene ja T-rakkude retseptoreid, kuid neil puuduvad muud tavalised lümfoidsed ja müeloidsed markerid. See ainulaadne immunofenotüüp koos kromosomaalsete ja morfoloogiliste omadustega toetab L428 rakkude liigitamist Hodgkini lümfoomi mudeliks, eriti RS- ja H-rakkude bioloogia uurimiseks.

L428 rakuliini on laialdaselt kasutatud uuringutes Hodgkini tõve patogeneesi uurimiseks ja võimalike terapeutiliste sihtmärkide uurimiseks. Selle võime in vitro paljuneda ja ainulaadsed omadused teevad sellest liini kriitilise tähtsusega ressursi selle keerulise hematoloogilise pahaloomulise haiguse paremaks mõistmiseks.

Kude
Pleuraefusioon
Haigus
Hodgkini lümfoom
Sünonüümid
  • L-428
  • L 428

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud
Rakutüüp
Lümfoblastid

04Tunnused

Viide
L428 (Cytioni katalooginumber 300200)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1361

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 1 mM naatriumpüruvaadi, 1% NEAAga
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Külvitihedus
1 x 105 rakku/ml
Vedeliku vahetus
Iga 3 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Kiire
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
37 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia