Células L-428

A linha de células L428 é uma linha de células neoplásicas bem estabelecida, derivada do derrame pleural de uma doente do sexo feminino a quem foi diagnosticada a doença de Hodgkin do tipo nodular esclerosante. O estabelecimento desta linha celular proporcionou um modelo valioso para o estudo das caraterísticas celulares e dos mecanismos moleculares subjacentes ao linfoma de Hodgkin. As células L428 assemelham-se muito às células Reed-Sternberg (RS) e Hodgkin (H), que são as células caraterísticas do linfoma de Hodgkin. Estas células demonstram um fenótipo único, distinto das células B típicas, das células T e de outros tipos de células hematopoiéticas, contribuindo para os debates em curso sobre a origem celular exacta das células RS e H.

A linha celular L428 apresenta várias caraterísticas distintivas, incluindo aneuploidia e a presença de múltiplas anomalias cromossómicas estruturais e numéricas, que são marcadores típicos da sua natureza neoplásica. Estas células não possuem imunoglobulinas (Igs) de superfície ou citoplasmáticas, apesar de derivarem de um tumor maligno linfoide, o que sugere uma diferenciação significativa em relação às células linfóides normais. A ausência de antigénios do vírus Epstein-Barr (EBV), como o EBNA e o VCA, distingue ainda mais a L428 de outras linhas celulares de linfoma de Hodgkin EBV-positivo. As células também não possuem atividade de lisozima, peroxidase e cloracetato esterase, o que reforça a sua distinção das células mielóides, monócitos ou macrófagos.

Em termos de morfologia, as células L428 apresentam uma gama de tamanhos, desde pequenas células mononucleares a grandes células multinucleadas, com algumas células a apresentarem projecções vilosas nas suas membranas. As células são também notáveis pelos seus nucléolos grandes, frequentemente em forma de rim. Funcionalmente, as células L428 expressam antigénios semelhantes a Ia e receptores de células T, mas são desprovidas de outros marcadores linfóides e mielóides comuns. Este imunofenótipo único, combinado com as caraterísticas cromossómicas e morfológicas, apoia a classificação da L428 como um modelo de linfoma de Hodgkin, particularmente para o estudo da biologia das células RS e H.

A linha celular L428 tem sido amplamente utilizada na investigação para explorar a patogénese da doença de Hodgkin e para investigar potenciais alvos terapêuticos. A sua capacidade de proliferação in vitro e as suas propriedades únicas tornam-na um recurso crítico para o avanço da compreensão desta complexa doença hematológica maligna.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia