Ga naar de inhoud
LoVo-cellijn
Weefsel
Colon, graad IV, Dukes' type C
Ziekte
Adenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Linker supraclaviculaire lymfeklier
Synoniemen
LOVO

Documenten

LoVo-cellijn

Cell line · Productnummer 300266

De LOVO-cellijn, afkomstig van een adenocarcinoom van de dikke darm van type C volgens de Dukes-classificatie, graad IV, wordt gekenmerkt door mutaties in het adenomateuze polyposis coli (APC)-gen...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De LOVO-cellijn, afgeleid van een graad IV Dukes' type C colonadenocarcinoom, wordt gekenmerkt door mutaties in het gen voor adenomateuze polyposis coli (APC), het Kirsten rat sarcoom viraal oncogen homoloog (KRAS) en het tumoreiwit p53 (TP53). Deze genetische kenmerken zijn belangrijk bij het bestuderen van de moleculaire basis van colorectale kankerprogressie, metastase en resistentiemechanismen tegen geneesmiddelen.

LoVo-cellen dienen als een cruciaal model voor het screenen van antikankermedicijnen en door te begrijpen hoe kankercellen zoals LoVo resistentie ontwikkelen, kunnen onderzoekers effectievere therapieën ontwerpen. LoVo-cellen worden ook gebruikt in moleculair biologisch onderzoek om signaalroutes te onderzoeken die de groei, overleving en uitzaaiing van kankercellen reguleren.

In de context van menselijke darmkanker en colorectale kanker cellijnen, bieden LoVo cellen inzicht in de mechanismen van tumorgroei en het proces van metastase, met name knooppuntmetastase, en de tumormicro-omgeving die kankerprogressie aanstuurt. Het gebruik van LoVo darmkankercellen, vooral in lovo xenograft-modellen, stelt onderzoekers in staat om de dynamiek van kankercellen en het metastatisch potentieel te bestuderen.

Diepgaande sequentieanalyse en genexpressieanalyse in LoVo-cellen hebben licht geworpen op de specifieke genen en hun rol in colorectale kankercellen. Dit onderzoek heeft het belang aangetoond van integrines, zoals integrine β1, bij de migratie en invasie van kankercellen en de regulatie van belangrijke moleculen zoals MMP2 in signaalroutes die bijdragen aan het begrip van de invasieve eigenschappen van kankercellijnen.

LoVo-cellen, als modelsysteem voor colorectale kankercellijnen, spelen een centrale rol in het bevorderen van ons begrip van de moleculaire aspecten van kanker, van gen- en eiwitexpressie tot de fijne kneepjes van tumorgroei en metastase.

Weefsel
Colon, graad IV, Dukes' type C
Ziekte
Adenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Linker supraclaviculaire lymfeklier
Synoniemen
  • LOVO

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
LoVo (Cytion catalogusnummer 300266)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0399

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, bloedgroep B
Iso-enzymen
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Oncogenen
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutatieprofiel
LOVO-cellen dragen een mutatie in codon 13 van het Kras-gen: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Reverse transcriptase
Negatief
Producten
Carcino-embryonaal antigeen (CEA) 908 ng/106 cellen/10 dagen

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Ham's F12K-medium, w: 2,0 mM L-glutamine, w: 2,0 mM natriumpyruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion-artikelnummer 820608a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
56 jaar