Prejsť na obsah
Bunková línia LoVo
Tkanivo
Dvojité črevo, stupeň IV, Dukesov typ C
Choroba
Adenokarcinóm
Miesto metastáz
Ľavá supraklavikulárna lymfatická uzlina
Synonymá
LOVO

Dokumenty

Bunková línia LoVo

Cell line · Číslo výrobku 300266

Bunka LOVO, odvodená z adenokarcinómu hrubého čreva typu C podľa Dukesa stupňa IV, sa vyznačuje mutáciami v géne adenomatóznej polypózy hrubého čreva (APC)...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia LOVO, odvodená z adenokarcinómu hrubého čreva typu C Dukes IV. stupňa, je charakterizovaná mutáciami v géne adenomatóznej polypózy coli (APC), v géne Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog (KRAS) a v nádorovom proteíne p53 (TP53). Tieto genetické vlastnosti sú dôležité pri štúdiu molekulárnej podstaty progresie kolorektálneho karcinómu, metastázovania a mechanizmov rezistencie na lieky.

Bunky LoVo slúžia ako dôležitý model na skríning protirakovinových zlúčenín a pochopením toho, ako sa u rakovinových buniek, ako je LoVo, vyvíja rezistencia, môžu výskumníci navrhnúť účinnejšie terapie. Bunky LoVo sa využívajú aj v molekulárno-biologických štúdiách na skúmanie signálnych dráh, ktoré regulujú rast, prežívanie a metastázovanie rakovinových buniek.

V kontexte bunkových línií ľudského karcinómu hrubého čreva a kolorektálneho karcinómu ponúkajú bunky LoVo pohľad na mechanizmy rastu nádoru a proces metastázovania, najmä metastázovania do uzlín, a na nádorové mikroprostredie, ktoré riadi progresiu rakoviny. Použitie LoVo buniek rakoviny hrubého čreva, najmä v lovo xenograftových modeloch, umožňuje výskumníkom študovať dynamiku rakovinových buniek a metastatický potenciál.

Hĺbkové sekvenovanie a analýza expresie génov v bunkách LoVo vrhli svetlo na špecifické gény a ich úlohy v bunkách kolorektálneho karcinómu. Tento výskum poukázal na význam integrínov, ako je integrín β1, pri migrácii a invázii rakovinových buniek a na reguláciu kľúčových molekúl, ako je MMP2, v signálnych dráhach, ktoré prispievajú k pochopeniu invazívnych vlastností rakovinových bunkových línií.

Bunky LoVo, ako modelový systém bunkových línií kolorektálneho karcinómu, zohrávajú kľúčovú úlohu pri napredovaní nášho chápania molekulárnych aspektov rakoviny, od expresie génov a proteínov až po zložitosti rastu a metastázovania nádorov.

Tkanivo
Dvojité črevo, stupeň IV, Dukesov typ C
Choroba
Adenokarcinóm
Miesto metastáz
Ľavá supraklavikulárna lymfatická uzlina
Synonymá
  • LOVO

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach

04Identifikátory

Citácia
LoVo (katalógové číslo Cytion 300266)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0399

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, krvná skupina B
Izoenzýmy
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogény
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutčný profil
Bunky LOVO nesú mutáciu v kodóne 13 génu Kras: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Reverzná transkriptáza
Negatívne
Produkty
Karcinoembryonálny antigén (CEA) 908 ng/106 buniek/10 dní

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Hamovo médium F12K, w: 2,0 mM L-glutamín, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,5 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820608a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
56 rokov