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LoVo-Zelllinie
Gewebe
Dickdarm, Grad IV, Dukes' Typ C
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Linker supraklavikulärer Lymphknoten
Synonyme
LOVO

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LoVo-Zelllinie

Cell line · Artikelnummer 300266

Die LOVO-Zelllinie, die aus einem Kolonadenokarzinom vom Typ C nach Dukes Grad IV gewonnen wurde, ist durch Mutationen im Adenomatous Polyposis Coli (APC)-Gen gekennzeichnet...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die LOVO-Zelllinie, die von einem Kolon-Adenokarzinom vom Grad IV des Dukes-Typs C abstammt, ist durch Mutationen im APC-Gen (adenomatöse Polyposis coli), im KRAS-Gen (Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog) und im Tumorprotein p53 (TP53) gekennzeichnet. Diese genetischen Merkmale sind für die Untersuchung der molekularen Grundlagen des Fortschreitens von Darmkrebs, der Metastasierung und der Mechanismen der Arzneimittelresistenz von entscheidender Bedeutung.

LoVo-Zellen sind ein wichtiges Modell für das Screening von Krebsmedikamenten. Wenn Forscher verstehen, wie Krebszellen wie LoVo Resistenzen entwickeln, können sie wirksamere Therapien entwickeln. LoVo-Zellen werden auch in molekularbiologischen Studien eingesetzt, um Signalwege zu erforschen, die das Wachstum, das Überleben und die Metastasierung von Krebszellen regulieren.

Im Zusammenhang mit menschlichem Kolonkarzinom und kolorektalen Krebszelllinien bieten LoVo-Zellen Einblicke in die Mechanismen des Tumorwachstums und den Prozess der Metastasierung, insbesondere der Knotenmetastasierung, sowie in die Mikroumgebung des Tumors, die das Fortschreiten des Krebses beeinflusst. Die Verwendung von LoVo-Kolon-Krebszellen, insbesondere in Lovo-Xenograft-Modellen, ermöglicht es Forschern, die Dynamik von Krebszellen und das Metastasierungspotenzial zu untersuchen.

Deep Sequencing und Genexpressionsanalysen in LoVo-Zellen haben Aufschluss über die spezifischen Gene und ihre Rolle in Dickdarmkrebszellen gegeben. Diese Forschung hat die Bedeutung von Integrinen, wie z. B. Integrin β1, für die Migration und Invasion von Krebszellen und die Regulierung von Schlüsselmolekülen wie MMP2 in Signalwegen aufgezeigt, die zum Verständnis der invasiven Eigenschaften von Krebszelllinien beitragen.

LoVo-Zellen spielen als Modellsystem für kolorektale Krebszelllinien eine zentrale Rolle bei der Verbesserung unseres Verständnisses der molekularen Aspekte von Krebs, von der Gen- und Proteinexpression bis hin zu den Feinheiten von Tumorwachstum und Metastasierung.

Gewebe
Dickdarm, Grad IV, Dukes' Typ C
Krankheit
Adenokarzinom
Metastasenherd
Linker supraklavikulärer Lymphknoten
Synonyme
  • LOVO

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen

04Bezeichner

Quellenangabe
LoVo (Cytion Katalognummer 300266)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0399

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, Blutgruppe B
Isoenzyme
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogene
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutationsprofil
LOVO-Zellen tragen eine Mutation im Codon 13 des Kras-Gens: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Reverse Transkriptase
Negativ
Produkte
Carcinoembryonales Antigen (CEA) 908 ng/106 Zellen/10 Tage

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820608a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
56 Jahre