Pāriet uz saturu
LoVo šūnu līnija
Audums
Resnās zarnas, IV pakāpe, Dukes C tips
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Kreisais virsklaiviskais limfmezgls
Sinonīmi
LOVO

Dokumenti

LoVo šūnu līnija

Cell line · Preces numurs 300266

LOVO šūnu līnija, kas iegūta no IV pakāpes Dukes C tipa resnās zarnas adenokarcinomas, raksturojas ar mutācijām adenomatozās polipozi (APC) gēnā...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

LOVO šūnu līnijai, kas iegūta no IV pakāpes Dukes C tipa resnās zarnas adenokarcinomas, ir raksturīgas mutācijas adenomatozās polipozes coli (APC) gēnā, Kirstena žurkas sarkomas vīrusa onkogēna homologā (KRAS) un audzēja proteīnā p53 (TP53). Šīs ģenētiskās iezīmes ir noderīgas, pētot kolorektālā vēža progresēšanas, metastāžu un rezistences pret zālēm mehānismu molekulāro pamatu.

LoVo šūnas kalpo kā būtisks modelis pretvēža savienojumu skrīningam, un, izprotot, kā tādas vēža šūnas kā LoVo veido rezistenci, pētnieki var izstrādāt efektīvākas terapijas. LoVo šūnas tiek izmantotas arī molekulārās bioloģijas pētījumos, lai izpētītu signālu ceļus, kas regulē vēža šūnu augšanu, izdzīvošanu un metastāzēšanu.

Saistībā ar cilvēka resnās zarnas vēža un kolorektālā vēža šūnu līnijām LoVo šūnas sniedz ieskatu par audzēja augšanas mehānismiem un metastāžu procesu, jo īpaši mezglu metastāzēm, un audzēja mikrovidi, kas veicina vēža progresēšanu. LoVo resnās zarnas vēža šūnu izmantošana, jo īpaši lovo ksenotransplantācijas modeļos, ļauj pētniekiem pētīt vēža šūnu dinamiku un metastātisko potenciālu.

Dziļa sekvenēšana un gēnu ekspresijas analīze LoVo šūnās ir atklājusi specifiskus gēnus un to lomu kolorektālā vēža šūnās. Šie pētījumi ir atklājuši integrīnu, piemēram, integrīna β1, nozīmi vēža šūnu migrācijā un invazijā, kā arī galveno molekulu, piemēram, MMP2, regulāciju signālu ceļos, kas palīdz izprast vēža šūnu līniju invazīvās īpašības.

LoVo šūnām kā kolorektālā vēža šūnu līniju modeļsistēmai ir izšķiroša nozīme vēža molekulāro aspektu, sākot no gēnu un olbaltumvielu ekspresijas līdz pat audzēja augšanas un metastāžu veidošanās niansēm, izpratnes veicināšanā.

Audums
Resnās zarnas, IV pakāpe, Dukes C tips
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Kreisais virsklaiviskais limfmezgls
Sinonīmi
  • LOVO

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
LoVo (Cytion kataloga numurs 300266)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0399

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, B asins grupa
Izoenzīmi
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogēni
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutāciju profils
LOVO šūnās ir Kras gēna 13. kodona mutācija: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Reversā transkriptāze
Negatīvs
Produkti
Karcinoembrionālais antigēns (CEA) 908 ng/106 šūnas/10 dienas

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Hama F12K barotne, w: 2,0 mM L-glutamīns, w: 2,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820608a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
56 gadi