Mine otse sisu juurde
LoVo rakuliin
Kude
Jämesool, IV aste, Dukes'i tüüp C
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Vasakpoolne supraklavikulaarne lümfisõlm
Sünonüümid
LOVO

Dokumendid

LoVo rakuliin

Cell line · Toote number 300266

LOVO rakuliin, mis on saadud IV astme Dukesi tüübi C käärsoole adenokartsinoomist, iseloomustavad mutatsioonid adenomatoosse polüpoosi coli (APC) geenis...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LOVO rakuliinile, mis on saadud IV astme Dukes'i C-tüüpi käärsoole adenokartsinoomist, on iseloomulikud mutatsioonid adenomatoosse polüpoosi koli (APC) geenis, Kirsten rotisarkoomi viirusliku onkogeeni homoloogis (KRAS) ja kasvajavalku p53 (TP53). Need geneetilised omadused on olulised kolorektaalvähi progresseerumise, metastaaside tekke ja ravimresistentsuse mehhanismide molekulaarsete aluste uurimisel.

LoVo rakud on kriitilise tähtsusega mudeliks vähivastaste ühendite sõelumiseks ning mõistes, kuidas LoVo-sugused vähirakud arendavad resistentsust, saavad teadlased kavandada tõhusamaid ravimeetodeid. LoVo rakke kasutatakse ka molekulaarbioloogilistes uuringutes, et uurida signaaliradu, mis reguleerivad vähirakkude kasvu, ellujäämist ja metastaaside teket.

Inimese jämesoolevähi ja kolorektaalvähi rakuliinide kontekstis annavad LoVo rakud ülevaate kasvaja kasvu ja metastaasiprotsessi mehhanismidest, eelkõige sõlmede metastaasist, ning vähi progresseerumist juhtivast kasvaja mikrokeskkonnast. LoVo käärsoolevähirakkude kasutamine, eriti lovo ksenotransplantaadi mudelites, võimaldab teadlastel uurida vähirakkude dünaamikat ja metastaatilist potentsiaali.

LoVo rakkude sügav sekveneerimine ja geeniekspressiooni analüüs on valgustanud spetsiifilisi geene ja nende rolli kolorektaalvähirakkudes. Need uuringud on toonud esile integriinide, näiteks integriini β1, tähtsuse vähirakkude migratsioonis ja invasiivsuses ning selliste võtmemolekulide nagu MMP2 regulatsiooni signaaliradadel, mis aitavad kaasa vähirakuliinide invasiivsete omaduste mõistmisele.

LoVo rakkudel kui kolorektaalvähi rakuliinide mudelisüsteemil on keskne roll vähi molekulaarsete aspektide mõistmise edendamisel, alates geenide ja valkude ekspressioonist kuni kasvajate kasvu ja metastaaside tekkimise keerukuseni.

Kude
Jämesool, IV aste, Dukes'i tüüp C
Haigus
Adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Vasakpoolne supraklavikulaarne lümfisõlm
Sünonüümid
  • LOVO

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
LoVo (Cytioni katalooginumber 300266)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0399

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, veregrupp B
Isoensüümid
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Onkogeenid
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutatsiooniprofiil
LOVO rakud kannavad mutatsiooni Kras'i geeni 13. koodonis: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
Kartsiinoembüooniline antigeen (CEA) 908 ng/106 rakku/10 päeva

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820608a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
56 aastat