
- Chusteczka
- Okrężnica, stopień IV, typ C wg Dukesa
- Choroba
- Gruczolakorak
- Miejsce przerzutów
- Lewy nadobojczykowy węzeł chłonny
- Synonimy
- LOVO
Dokumenty
Linia komórkowa LoVo
Cell line · Numer produktu 300266
Linia komórkowa LOVO, wyhodowana z gruczolakoraka jelita grubego typu C w IV stopniu za klasyfikacją Dukesa, charakteryzuje się mutacjami w genie adenomatous polyposis coli (APC)...
Dostosowanie / Zalecenia
- Linia komórkowa LoVoCell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Linia komórkowa LOVO, pochodząca z gruczolakoraka okrężnicy typu C w stopniu IV wg Dukesa, charakteryzuje się mutacjami w genie gruczolakowatej polipowatości jelita grubego (APC), homologu onkogenu wirusowego mięsaka szczura Kirsten (KRAS) i białku nowotworowym p53 (TP53). Te cechy genetyczne mają kluczowe znaczenie w badaniu molekularnych podstaw progresji raka jelita grubego, przerzutów i mechanizmów oporności na leki.
Komórki LoVo służą jako krytyczny model do badań przesiewowych związków przeciwnowotworowych, a dzięki zrozumieniu, w jaki sposób komórki nowotworowe, takie jak LoVo, rozwijają oporność, naukowcy mogą projektować skuteczniejsze terapie. Komórki LoVo są również wykorzystywane w badaniach biologii molekularnej w celu zbadania szlaków sygnałowych, które regulują wzrost, przeżycie i przerzuty komórek nowotworowych.
W kontekście ludzkich linii komórkowych raka okrężnicy i raka jelita grubego, komórki LoVo oferują wgląd w mechanizmy wzrostu guza i proces przerzutów, w szczególności przerzutów do węzłów, a także mikrośrodowisko guza napędzające progresję raka. Wykorzystanie komórek raka jelita grubego LoVo, zwłaszcza w modelach lovo xenograft, umożliwia naukowcom badanie dynamiki komórek nowotworowych i potencjału przerzutowego.
Głębokie sekwencjonowanie i analiza ekspresji genów w komórkach LoVo rzuciły światło na konkretne geny i ich rolę w komórkach raka jelita grubego. Badania te podkreśliły znaczenie integryn, takich jak integryna β1, w migracji i inwazji komórek nowotworowych, a także regulację kluczowych cząsteczek, takich jak MMP2, w szlakach sygnałowych przyczyniających się do zrozumienia inwazyjnych właściwości linii komórek nowotworowych.
Komórki LoVo, jako modelowy system linii komórkowych raka jelita grubego, odgrywają kluczową rolę w pogłębianiu naszego zrozumienia molekularnych aspektów raka, od ekspresji genów i białek po zawiłości wzrostu guza i przerzutów.
- Chusteczka
- Okrężnica, stopień IV, typ C wg Dukesa
- Choroba
- Gruczolakorak
- Miejsce przerzutów
- Lewy nadobojczykowy węzeł chłonny
- Synonimy
- LOVO
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Nowotworotwórczy
- Tak, u nagich myszy
04Identyfikatory
- Źródło
- LoVo (numer katalogowy Cytion 300266)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0399
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja antygenu
- HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, grupa krwi B
- Izoenzymy
- G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
- Onkogeny
- Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
- Profil mutacji
- Komórki LOVO są nosicielami mutacji w kodonie 13 genu Kras: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Transkryptaza odwrotna
- Negatywny
- Produkty
- Antygen rakowo-płodowy (CEA) 908 ng/106 komórek/10 dni
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- Pożywka Ham's F12K, w: 2,0 mM L-glutamina, w: 2,0 mM pirogronian sodu, w: 2,5 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820608a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- 1 x 104 komórek/cm2
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
- Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 56 lat
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
.jpg)
