Ir diretamente para o conteúdo
Linha celular LoVo
Tecido
Cólon, grau IV, tipo C de Dukes
Doença
Adenocarcinoma
Local da metástase
Linfonodo supraclavicular esquerdo
Sinónimos
LOVO

Documentos

Linha celular LoVo

Cell line · Número do produto 300266

A linha celular LOVO, derivada de um adenocarcinoma do cólon de grau IV, tipo C, segundo a classificação de Dukes, caracteriza-se por mutações no gene da polipose adenomatosa coli (APC)...

€430.00sem impostos nem portes de envio
Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular LOVO, derivada de um adenocarcinoma do cólon de grau IV do tipo C de Dukes, é caracterizada por mutações no gene da polipose adenomatosa coli (APC), no homólogo do oncogene viral do sarcoma do rato de Kirsten (KRAS) e na proteína tumoral p53 (TP53). Estas caraterísticas genéticas são fundamentais para o estudo da base molecular da progressão do cancro colorrectal, das metástases e dos mecanismos de resistência aos medicamentos.

As células LoVo constituem um modelo essencial para o rastreio de compostos anticancerígenos e, ao compreenderem como as células cancerígenas como as LoVo desenvolvem resistência, os investigadores podem conceber terapias mais eficazes. As células LoVo são também utilizadas em estudos de biologia molecular para explorar as vias de sinalização que regulam o crescimento, a sobrevivência e as metástases das células cancerosas.

No contexto do cancro do cólon humano e das linhas celulares do cancro colorrectal, as células LoVo permitem compreender os mecanismos de crescimento do tumor e o processo de metástase, em especial a metástase nodal, bem como o microambiente tumoral que determina a progressão do cancro. A utilização de células de cancro do cólon LoVo, especialmente em modelos de xenoenxertos lovo, permite aos investigadores estudar a dinâmica das células cancerosas e o potencial metastático.

A sequenciação profunda e a análise da expressão dos genes nas células LoVo permitiram esclarecer os genes específicos e o seu papel nas células do cancro colorrectal. Esta investigação destacou a importância das integrinas, como a integrina β1, na migração e invasão das células cancerosas, e a regulação de moléculas-chave como a MMP2 em vias de sinalização que contribuem para a compreensão das propriedades invasivas das linhas de células cancerosas.

As células LoVo, como sistema modelo em linhas celulares de cancro colorrectal, desempenham um papel fundamental no avanço da nossa compreensão dos aspectos moleculares do cancro, desde a expressão de genes e proteínas até aos meandros do crescimento tumoral e das metástases.

Tecido
Cólon, grau IV, tipo C de Dukes
Doença
Adenocarcinoma
Local da metástase
Linfonodo supraclavicular esquerdo
Sinónimos
  • LOVO

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus

04Identificadores

Referência
LoVo (número de catálogo Cytion 300266)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0399

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
HLA A11, B15, B17, Cw1, Cw3, tipo de sangue B
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 2, PGM3, 1-2, 6PGD, A, ES-D, 1
Oncogenes
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Perfil mutacional
As células LOVO são portadoras de uma mutação no códão 13 do gene Kras: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Transcriptase reversa
Negativo
Produtos
Antigénio carcinoembrionário (CEA) 908 ng/106 células/10 dias

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Ham's F12K Medium, com: 2,0 mM L-Glutamina, com: 2,0 mM Piruvato de sódio, com: 2,5 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820608a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
56 anos