Ga naar de inhoud
SKM-1
Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
acute myeloïde leukemie
Synoniemen
SKM1

Documenten

SKM-1

Cell line · Productnummer 305627

The SKM-1 cell line is a human leukemia model established from the peripheral blood of a patient with acute monoblastic leukemia that developed from myelo...

€500.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De SKM-1-cellijn is een menselijk leukemiemodel dat is ontwikkeld op basis van het perifere bloed van een patiënt met acute monoblastische leukemie die is ontstaan uit myelodysplastisch syndroom (MDS). Deze cellen vertonen onvolgroeide morfologische kenmerken, zoals een hoge kern-cytoplasma-verhouding en fijne azurofiele granulen, waardoor ze een uitstekend model zijn voor het bestuderen van de moleculaire en cellulaire mechanismen van leukemie, met name de overgang van MDS naar acute myeloïde leukemie (AML).

Genetische analyse van SKM-1 heeft belangrijke chromosomale afwijkingen aan het licht gebracht, waaronder del(9)(q13;q22) en der(17)t(17:?)(p13:?); de laatste verandering betreft het p53-gen, dat in deze cellijn tot overexpressie komt en mutaties bevat. Deze bevindingen benadrukken de rol van p53 in de klonale evolutie en progressie van myeloïde maligniteiten. SKM-1-cellen worden ook gekenmerkt door hun expressie van myelomonocytische markers, waaronder CD4, CD13 en CD33, evenals hun positiviteit voor butyraatesterase-activiteit, wat overeenkomt met hun monoblastische afstamming.

Deze cellijn wordt veel gebruikt in onderzoek naar leukemogenese, resistentie tegen geneesmiddelen en de moleculaire routes die ten grondslag liggen aan leukemie. SKM-1 biedt bijvoorbeeld een platform voor het onderzoeken van de effecten van p53-disfunctie en andere genetische laesies op celproliferatie en therapeutische respons. Het dient ook als model voor het onderzoeken van nieuwe therapeutische strategieën voor myelodysplastische syndromen en secundaire AML.

Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
acute myeloïde leukemie
Synoniemen
  • SKM1

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Ronde cellen
Verdubbelingstijd
48 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
SKM-1 (Cytion-catalogusnummer 305627)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0098

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
CD3 -, CD4 (+), CD13 +, CD14 -, CD15 +, CD19 -, CD33 +, HLA-DR +;
Mutatieprofiel
Mutatie: ASXL1, eenvoudig, p.Tyr591Ter (c.1773C>A), homozygoot; Mutatie: BCORL1, eenvoudig, c.4619-1G>A, homozygoot, splice-acceptormutatie; Mutatie: EZH2, eenvoudig, p.Tyr646Cys (c.1937A>G), heterozygoot; Mutatie: KRAS, eenvoudig, p.Lys117Asn (c.351A>C), homozygoot; Mutatie: TP53, eenvoudig, p.Arg248Gln (c.743G>A), homozygoot
Virussen
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 15% FBS
Dissociatiereagens
Geen
Zaaidichtheid
0,3 tot 1 x 106 cellen/ml
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
76 jaar
Etnische afkomst
Japans