Mine otse sisu juurde
SKM-1
Kude
Perifeerne veri
Haigus
äge müeloidne leukeemia
Sünonüümid
SKM1

Dokumendid

SKM-1

Cell line · Toote number 305627

The SKM-1 cell line is a human leukemia model established from the peripheral blood of a patient with acute monoblastic leukemia that developed from myelo...

€500.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SKM-1 rakuliin on inimese leukeemia mudel, mis on loodud ägeda monoblastilise leukeemiaga patsiendi perifeersest verest, mis arenes välja müelodüsplastilisest sündroomist (MDS). Need rakud näitavad ebaküpset morfoloogilist struktuuri, nagu kõrge tuuma ja tsütoplasma suhe ning peened atsurofiilsed graanulid, mis teeb neist suurepärase mudeli leukeemia molekulaar- ja rakumehhanismide uurimiseks, eriti MDS-ist ägedasse müeloidleukeemiasse (AML) ülemineku uurimiseks.

SKM-1 geneetiline analüüs on näidanud olulisi kromosoomianomaaliaid, sealhulgas del(9)(q13;q22) ja der(17)t(17:?)(p13:?); viimane muutus hõlmab p53 geeni, mis on üliekspresseeritud ja sisaldab mutatsioone selles rakuliinis. Need leiud rõhutavad p53 rolli kloonide evolutsioonis ja müeloidse pahaloomulise kasvaja progresseerumises. SKM-1 rakke iseloomustab ka müelomonootsüütide markerite, sealhulgas CD4, CD13 ja CD33 ekspressioon, samuti butüraatesteraasi aktiivsuse positiivsus, mis on kooskõlas nende monoblastilise päritoluga.

Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt leukeemogeneesi, ravimresistentsuse ja leukeemia molekulaarsete mehhanismide uurimisel. Näiteks pakub SKM-1 platvormi p53-düsfunktsiooni ja muude geneetiliste kahjustuste mõju uurimiseks rakkude proliferatsioonile ja ravivastusele. Samuti on see mudeliks uute ravistrateegiate uurimiseks müelodüsplastiliste sündroomide ja sekundaarse AML-i puhul.

Kude
Perifeerne veri
Haigus
äge müeloidne leukeemia
Sünonüümid
  • SKM1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud
Kahekordistumisaeg
48 tundi

04Tunnused

Viide
SKM-1 (Cytioni katalooginumber 305627)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0098

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
CD3-, CD4(+), CD13+, CD14-, CD15+, CD19-, CD33+, HLA-DR+;
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: ASXL1, lihtne, p.Tyr591Ter (c.1773C>A), homosügootne; Mutatsioon: BCORL1, lihtne, c.4619-1G>A, homosügootne, splaissingu aktseptori mutatsioon; Mutatsioon: EZH2, lihtne, p.Tyr646Cys (c.1937A>G), heterosügootne; Mutatsioon: KRAS, lihtne, p.Lys117Asn (c.351A>C), homosügootne; Mutatsioon: TP53, lihtne, p.Arg248Gln (c.743G>A), homosügootne
Viirused
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -, SMRV -

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada keskkonda 15% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Puudub
Külvitihedus
0,3 kuni 1 x 106 rakku/ml
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
76 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani