SKM-1

A linhagem celular SKM-1 é um modelo de leucemia humana estabelecido a partir do sangue periférico de um paciente com leucemia monoblástica aguda que se desenvolveu a partir de uma síndrome mielodisplásica (SMD). Essas células apresentam características morfológicas imaturas, como uma alta relação núcleo/citoplasma e grânulos azurofílicos finos, o que as torna um excelente modelo para o estudo dos mecanismos moleculares e celulares da leucemia, particularmente a transição da SMD para a leucemia mieloide aguda (LMA).

A análise genética da SKM-1 revelou importantes anomalias cromossômicas, incluindo del(9)(q13;q22) e der(17)t(17:?)(p13:?); esta última alteração envolve o gene p53, que é superexpresso e apresenta mutações nessa linhagem celular. Essas descobertas destacam o papel do p53 na evolução clonal e na progressão de neoplasias mieloides. As células SKM-1 também são caracterizadas pela expressão de marcadores mielomonocíticos, incluindo CD4, CD13 e CD33, bem como pela positividade para a atividade da butiratoesterase, o que está de acordo com sua linhagem monoblástica.

Essa linhagem celular é amplamente utilizada em pesquisas sobre leucemogênese, resistência a medicamentos e as vias moleculares subjacentes à leucemia. Por exemplo, a SKM-1 oferece uma plataforma para explorar os impactos da disfunção do p53 e de outras lesões genéticas na proliferação celular e na resposta terapêutica. Ela também serve como modelo para investigar novas estratégias terapêuticas para síndromes mielodisplásicas e LMA secundária.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.