Preskoči na vsebino
SKM-1
Tkivo
Periferna kri
Bolezen
akutna mieloidna levkemija
Sinonimi
SKM1

Dokumenti

SKM-1

Cell line · Številka izdelka 305627

The SKM-1 cell line is a human leukemia model established from the peripheral blood of a patient with acute monoblastic leukemia that developed from myelo...

€500.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija SKM-1 je model človeške levkemije, vzpostavljen iz perifernega krvi pacienta z akutno monoblastno levkemijo, ki se je razvila iz mielodisplastičnega sindroma (MDS). Te celice kažejo nezrele morfološke značilnosti, kot so visoko razmerje med jedrom in citoplazmo ter drobni azurofilni granuli, zaradi česar so odličen model za preučevanje molekularnih in celičnih mehanizmov levkemije, zlasti prehoda iz MDS v akutno mieloidno levkemijo (AML).

Genetska analiza SKM-1 je razkrila pomembne kromosomske anomalije, vključno z del(9)(q13;q22) in der(17)t(17:?)(p13:?); slednja sprememba vključuje gen p53, ki je prekomerno izražen in vsebuje mutacije v tej celični liniji. Ti izsledki poudarjajo vlogo p53 v klonalni evoluciji in napredovanju mieloidnih malignomov. Celice SKM-1 so značilne tudi po izražanju mielomonocičnih markerjev, vključno s CD4, CD13 in CD33, ter po pozitivnosti za aktivnost butirat esteraze, kar je v skladu z njihovo monoblastno linijo.

Ta celična linija se pogosto uporablja v raziskavah o levkemogenezi, odpornosti na zdravila in molekularnih poteh, ki so osnova levkemije. SKM-1 na primer zagotavlja platformo za raziskovanje vplivov disfunkcije p53 in drugih genetskih poškodb na celično proliferacijo in terapevtski odziv. Služi tudi kot model za raziskovanje novih terapevtskih strategij za mielodisplastične sindrome in sekundarno AML.

Tkivo
Periferna kri
Bolezen
akutna mieloidna levkemija
Sinonimi
  • SKM1

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Okrogle celice
Čas podvojitve
48 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
SKM-1 (številka kataloga Cytion 305627)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0098

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
CD3 -, CD4 (+), CD13 +, CD14 -, CD15 +, CD19 -, CD33 +, HLA-DR +;
Profil mutacij
Mutacija: ASXL1, preprosta, p.Tyr591Ter (c.1773C>A), homozigotna; Mutacija: BCORL1, preprosta, c.4619-1G>A, homozigotna, mutacija sprejemnika splice; Mutacija: EZH2, preprosta, p.Tyr646Cys (c.1937A>G), heterozigotna; Mutacija: KRAS, preprosta, p.Lys117Asn (c.351A>C), homozigotna; Mutacija: TP53, preprosta, p.Arg248Gln (c.743G>A), homozigotna
Virusi
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite s 15 % FBS
Reagenca za disociacijo
Nič
Gostota setve
0,3 do 1 x 106 celic/ml
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
76 let
Etnična pripadnost
Japonski