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SKM-1
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
leucemia mieloide acuta
Sinonimi
SKM1

Documenti

SKM-1

Cell line · Codice prodotto 305627

The SKM-1 cell line is a human leukemia model established from the peripheral blood of a patient with acute monoblastic leukemia that developed from myelo...

€500.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare SKM-1 è un modello di leucemia umana ottenuto dal sangue periferico di un paziente affetto da leucemia monoblastica acuta sviluppatasi da sindrome mielodisplastica (MDS). Queste cellule presentano caratteristiche morfologiche immature, come un elevato rapporto nucleo-citoplasma e granuli azurofili fini, che le rendono un modello eccellente per lo studio dei meccanismi molecolari e cellulari della leucemia, in particolare della transizione dalla MDS alla leucemia mieloide acuta (AML).

L'analisi genetica di SKM-1 ha rivelato importanti anomalie cromosomiche, tra cui del(9)(q13;q22) e der(17)t(17:?)(p13:?); quest'ultima alterazione coinvolge il gene p53, che è sovraespresso e presenta mutazioni in questa linea cellulare. Questi risultati evidenziano il ruolo di p53 nell'evoluzione clonale e nella progressione delle neoplasie mieloidi. Le cellule SKM-1 sono inoltre caratterizzate dall'espressione di marcatori mielomonocitici, tra cui CD4, CD13 e CD33, nonché dalla positività all'attività della butirrato esterasi, in linea con il loro lignaggio monoblastico.

Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata nella ricerca sulla leucemogenesi, sulla resistenza ai farmaci e sui percorsi molecolari alla base della leucemia. Ad esempio, SKM-1 fornisce una piattaforma per esplorare gli impatti della disfunzione di p53 e di altre lesioni genetiche sulla proliferazione cellulare e sulla risposta terapeutica. Serve anche come modello per lo studio di nuove strategie terapeutiche per le sindromi mielodisplastiche e la LMA secondaria.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
leucemia mieloide acuta
Sinonimi
  • SKM1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Celle rotonde
Tempo di raddoppio
48 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SKM-1 (numero di catalogo Cytion 305627)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0098

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
CD3 -, CD4 (+), CD13 +, CD14 -, CD15 +, CD19 -, CD33 +, HLA-DR +;
Profilo mutazionale
Mutazione: ASXL1, semplice, p.Tyr591Ter (c.1773C>A), omozigote; Mutazione: BCORL1, semplice, c.4619-1G>A, omozigote, mutazione dell'accettore di splicing; Mutazione: EZH2, semplice, p.Tyr646Cys (c.1937A>G), eterozigote; Mutazione: KRAS, semplice, p.Lys117Asn (c.351A>C), omozigote; Mutazione: TP53, semplice, p.Arg248Gln (c.743G>A), omozigote
Virus
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 15% di FBS
Reagente di dissociazione
Nessuno
Densità di semina
Da 0,3 a 1 x 106 cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
76 anni
Etnia
Giapponese