Siirry sisältöön
SKM-1
Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
akuutti myelooinen leukemia
Synonyymit
SKM1

Asiakirjat

SKM-1

Cell line · Tuotenumero 305627

The SKM-1 cell line is a human leukemia model established from the peripheral blood of a patient with acute monoblastic leukemia that developed from myelo...

€500.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

SKM-1-solulinja on ihmisen leukemia-malli, joka on perustettu myelodysplastisesta oireyhtymästä (MDS) kehittyneen akuutin monoblastisen leukemian potilaan ääreisverestä. Nämä solut osoittavat epäkypsiä morfologisia piirteitä, kuten korkean tumasuhteen ja hienoja atsurofiilisiä rakeita, mikä tekee niistä erinomaisen mallin leukemian molekyyli- ja solumekanismien tutkimiseen, erityisesti MDS:n siirtymiseen akuutiksi myelooiseksi leukemiaksi (AML).

SKM-1:n geneettinen analyysi on paljastanut tärkeitä kromosomipoikkeavuuksia, kuten del(9)(q13;q22) ja der(17)t(17:?)(p13:?); jälkimmäinen muutos koskee p53-geeniä, joka on yli-ilmentynyt ja sisältää mutaatioita tässä solulinjassa. Nämä havainnot korostavat p53:n roolia klonaalisessa evoluutiossa ja myelooisten pahanlaatuisten kasvainten etenemisessä. SKM-1-soluille on ominaista myös myelomonosyyttisten merkkiaineiden, kuten CD4, CD13 ja CD33, ilmentyminen sekä butyraattiesterasiaktiivisuuden positiivisuus, mikä on yhdenmukaista niiden monoblastisen sukupolven kanssa.

Tätä solulinjaa käytetään laajasti leukemogeneesin, lääkeresistenssin ja leukemian taustalla olevien molekyylireittien tutkimuksessa. SKM-1 tarjoaa esimerkiksi alustan p53-geenin toimintahäiriön ja muiden geneettisten vaurioiden vaikutusten tutkimiseen solujen proliferaatiossa ja terapeuttisessa vasteessa. Se toimii myös mallina uusien terapeuttisten strategioiden tutkimisessa myelodysplastisissa oireyhtymissä ja sekundaarisessa AML:ssä.

Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
akuutti myelooinen leukemia
Synonyymit
  • SKM1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Pyöreät kennot
Kaksinkertaistumisaika
48 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
SKM-1 (Cytion-tuotenumero 305627)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0098

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
CD3-, CD4(+), CD13+, CD14-, CD15+, CD19-, CD33+, HLA-DR+;
Mutaatioprofiili
Mutaatio: ASXL1, yksinkertainen, p.Tyr591Ter (c.1773C>A), homotsygoottinen; Mutaatio: BCORL1, yksinkertainen, c.4619-1G>A, homotsygoottinen, splice-akseptori-mutaatio; Mutaatio: EZH2, yksinkertainen, p.Tyr646Cys (c.1937A>G), heterotsygoottinen; Mutaatio: KRAS, yksinkertainen, p.Lys117Asn (c.351A>C), homotsygoottinen; Mutaatio: TP53, yksinkertainen, p.Arg248Gln (c.743G>A), homotsygoottinen
Virukset
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -, SMRV -

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 15 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Ei mitään
Kylvötiheys
0,3–1 x 106 solua/ml
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
76 vuotta
Etnisyys
Japanilainen