Pāriet uz saturu
SKM-1
Audums
Perifērās asinis
Slimība
akūta mieloīdā leikēmija
Sinonīmi
SKM1

Dokumenti

SKM-1

Cell line · Preces numurs 305627

The SKM-1 cell line is a human leukemia model established from the peripheral blood of a patient with acute monoblastic leukemia that developed from myelo...

€500.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SKM-1 šūnu līnija ir cilvēka leikēmijas modelis, kas izveidots no pacienta perifērās asinis, kurš slimo ar akūtu monoblastisko leikēmiju, kas attīstījusies no mielodisplastiskā sindroma (MDS). Šīs šūnas uzrāda nenobriedušas morfoloģiskas pazīmes, piemēram, augstu kodola un citoplazmas attiecību un smalkas azurofīlas granulas, kas padara tās par izcilu modeli leikēmijas molekulāro un šūnu mehānismu pētīšanai, jo īpaši pārejai no MDS uz akūtu mieloīdo leikēmiju (AML).

SKM-1 ģenētiskā analīze ir atklājusi svarīgas hromosomu anomālijas, tostarp del(9)(q13;q22) un der(17)t(17:?)(p13:?); pēdējā izmaiņa ietekmē p53 gēnu, kas šajā šūnu līnijā ir pārmērīgi ekspresēts un satur mutācijas. Šie atklājumi uzsver p53 nozīmi klonālās evolūcijas un mieloīdo malignitāšu progresēšanā. SKM-1 šūnas raksturo arī mielomonocītu marķieru ekspresija, tostarp CD4, CD13 un CD33, kā arī to pozitīvā reakcija uz butirāta esterāzes aktivitāti, kas atbilst to monoblastiskajai ciltsrakstībai.

Šī šūnu līnija tiek plaši izmantota pētījumos par leikēmijas attīstību, zāļu rezistenci un molekulārajiem procesiem, kas ir leikēmijas pamatā. Piemēram, SKM-1 nodrošina platformu, lai pētītu p53 disfunkcijas un citu ģenētisko bojājumu ietekmi uz šūnu proliferāciju un terapeitisko reakciju. Tā kalpo arī kā modelis, lai pētītu jaunas terapeitiskas stratēģijas mielodisplastiskajiem sindromiem un sekundārajai AML.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
akūta mieloīdā leikēmija
Sinonīmi
  • SKM1

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Apaļas šūnas
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
48 stundas

04Identifikatori

Atsauce
SKM-1 (Cytion kataloga numurs 305627)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0098

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
CD3 -, CD4 (+), CD13 +, CD14 -, CD15 +, CD19 -, CD33 +, HLA-DR +;
Mutāciju profils
Mutācija: ASXL1, vienkārša, p.Tyr591Ter (c.1773C>A), homozigota; Mutācija: BCORL1, vienkārša, c.4619-1G>A, homozigota, splaisa akceptora mutācija; Mutācija: EZH2, vienkārša, p.Tyr646Cys (c.1937A>G), heterozigota; Mutācija: KRAS, vienkārša, p.Lys117Asn (c.351A>C), homozigota; Mutācija: TP53, vienkārša, p.Arg248Gln (c.743G>A), homozigota
Vīrusi
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 15% FBS
Disociācijas reaģents
Neviens
Sēšanas blīvums
0,3 līdz 1 x 106 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
76 gadi
Etniskā piederība
Japāņu