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SKM-1
Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
akute myeloische Leukämie
Synonyme
SKM1

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SKM-1

Cell line · Artikelnummer 305627

The SKM-1 cell line is a human leukemia model established from the peripheral blood of a patient with acute monoblastic leukemia that developed from myelo...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die SKM-1-Zelllinie ist ein menschliches Leukämie-Modell, das aus dem peripheren Blut eines Patienten mit akuter monoblastischer Leukämie, die sich aus einem myelodysplastischen Syndrom (MDS) entwickelt hat, gewonnen wurde. Diese Zellen weisen unreife morphologische Merkmale auf, wie beispielsweise ein hohes Verhältnis von Kern zu Zytoplasma und feine azurophile Granula, was sie zu einem hervorragenden Modell für die Untersuchung der molekularen und zellulären Mechanismen der Leukämie macht, insbesondere des Übergangs von MDS zu akuter myeloischer Leukämie (AML).

Die genetische Analyse von SKM-1 hat wichtige chromosomale Anomalien aufgezeigt, darunter del(9)(q13;q22) und der(17)t(17:?)(p13:?); die letztere Veränderung betrifft das p53-Gen, das in dieser Zelllinie überexprimiert wird und Mutationen aufweist. Diese Ergebnisse unterstreichen die Rolle von p53 bei der klonalen Evolution und dem Fortschreiten von myeloischen Malignomen. SKM-1-Zellen zeichnen sich auch durch die Expression von myelomonozytären Markern wie CD4, CD13 und CD33 sowie durch ihre Positivität für Butyratesteraseaktivität aus, was mit ihrer monoblastischen Abstammung übereinstimmt.

Diese Zelllinie wird häufig in der Forschung zu Leukämogenese, Arzneimittelresistenz und den molekularen Signalwegen, die der Leukämie zugrunde liegen, verwendet. So bietet SKM-1 beispielsweise eine Plattform für die Untersuchung der Auswirkungen von p53-Dysfunktionen und anderen genetischen Läsionen auf die Zellproliferation und das Ansprechen auf Therapien. Sie dient auch als Modell für die Erforschung neuer therapeutischer Strategien für myelodysplastische Syndrome und sekundäre AML.

Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
akute myeloische Leukämie
Synonyme
  • SKM1

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Runde Zellen
Verdopplungszeit
48 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
SKM-1 (Cytion-Katalognummer 305627)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0098

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
CD3-, CD4+, CD13+, CD14-, CD15+, CD19-, CD33+, HLA-DR+;
Mutationsprofil
Mutation: ASXL1, einfach, p.Tyr591Ter (c.1773C>A), homozygot; Mutation: BCORL1, einfach, c.4619-1G>A, homozygot, Spleißakzeptor-Mutation; Mutation: EZH2, einfach, p.Tyr646Cys (c.1937A>G), heterozygot; Mutation: KRAS, einfach, p.Lys117Asn (c.351A>C), homozygot; Mutation: TP53, einfach, p.Arg248Gln (c.743G>A), homozygot
Viren
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 15% FBS
Dissoziationsreagenz
Keine
Aussaatdichte
0,3 bis 1 x 106 Zellen/ml
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
76 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Japanisch