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SKM-1
Tecido
Sangue periférico
Doença
leucemia mielóide aguda
Sinónimos
SKM1

Documentos

SKM-1

Cell line · Número do produto 305627

The SKM-1 cell line is a human leukemia model established from the peripheral blood of a patient with acute monoblastic leukemia that developed from myelo...

€500.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular SKM-1 é um modelo de leucemia humana estabelecido a partir do sangue periférico de um paciente com leucemia monoblástica aguda que se desenvolveu a partir da síndrome mielodisplásica (MDS). Estas células apresentam características morfológicas imaturas, tais como uma elevada relação núcleo-citoplasma e grânulos azurofílicos finos, tornando-as um excelente modelo para estudar os mecanismos moleculares e celulares da leucemia, particularmente a transição da SMD para a leucemia mielóide aguda (LMA).

A análise genética da SKM-1 revelou importantes anomalias cromossómicas, incluindo del(9)(q13;q22) e der(17)t(17:?)(p13:?); a última alteração envolve o gene p53, que é superexpresso e abriga mutações nesta linha celular. Essas descobertas destacam o papel do p53 na evolução clonal e na progressão de neoplasias mielóides. As células SKM-1 também são caracterizadas pela expressão de marcadores mielomonocíticos, incluindo CD4, CD13 e CD33, bem como pela sua positividade para a atividade da butirato esterase, o que se alinha com a sua linhagem monoblástica.

Esta linha celular é amplamente utilizada em pesquisas sobre leucemogênese, resistência a medicamentos e as vias moleculares subjacentes à leucemia. Por exemplo, a SKM-1 fornece uma plataforma para explorar os impactos da disfunção do p53 e outras lesões genéticas na proliferação celular e na resposta terapêutica. Ela também serve como um modelo para investigar novas estratégias terapêuticas para síndromes mielodisplásicas e LMA secundária.

Tecido
Sangue periférico
Doença
leucemia mielóide aguda
Sinónimos
  • SKM1

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Células redondas
Tempo de duplicação
48 horas

04Identificadores

Referência
SKM-1 (número de catálogo Cytion 305627)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0098

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
CD3 -, CD4 (+), CD13 +, CD14 -, CD15 +, CD19 -, CD33 +, HLA-DR +;
Perfil mutacional
Mutação: ASXL1, simples, p.Tyr591Ter (c.1773C>A), homozigótica; Mutação: BCORL1, simples, c.4619-1G>A, homozigótica, mutação do aceitador de splicing; Mutação: EZH2, simples, p.Tyr646Cys (c.1937A>G), heterozigótica; Mutação: KRAS, simples, p.Lys117Asn (c.351A>C), homozigótica; Mutação: TP53, simples, p.Arg248Gln (c.743G>A), homozigótica
Vírus
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 15% de FBS
Reagente de dissociação
Nenhum
Densidade de sementeira
0,3 a 1 x 106 células/ml
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
76 anos
Etnia
Japonês