Przejdź do treści
SKM-1
Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
ostra białaczka szpikowa
Synonimy
SKM1

Dokumenty

SKM-1

Cell line · Numer produktu 305627

The SKM-1 cell line is a human leukemia model established from the peripheral blood of a patient with acute monoblastic leukemia that developed from myelo...

€500.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa SKM-1 jest modelem ludzkiej białaczki utworzonym z krwi obwodowej pacjenta z ostrą białaczką monoblastyczną, która rozwinęła się z zespołu mielodysplastycznego (MDS). Komórki te wykazują niedojrzałe cechy morfologiczne, takie jak wysoki stosunek jądra do cytoplazmy i drobne granulki azurofilowe, co czyni je doskonałym modelem do badania molekularnych i komórkowych mechanizmów białaczki, w szczególności przejścia od MDS do ostrej białaczki szpikowej (AML).

Analiza genetyczna SKM-1 ujawniła istotne nieprawidłowości chromosomowe, w tym del(9)(q13;q22) i der(17)t(17:?)(p13:?); ta ostatnia zmiana dotyczy genu p53, który jest nadekspresjonowany i zawiera mutacje w tej linii komórkowej. Odkrycia te podkreślają rolę p53 w ewolucji klonalnej i progresji nowotworów szpikowych. Komórki SKM-1 charakteryzują się również ekspresją markerów mielomonocytowych, w tym CD4, CD13 i CD33, a także dodatnią aktywnością esterazy maślanej, co jest zgodne z ich monoblastycznym pochodzeniem.

Linia komórkowa ta jest szeroko stosowana w badaniach nad leukemogenezą, opornością na leki i szlakami molekularnymi leżącymi u podstaw białaczki. Na przykład SKM-1 stanowi platformę do badania wpływu dysfunkcji p53 i innych zmian genetycznych na proliferację komórek i odpowiedź terapeutyczną. Służy również jako model do badania nowych strategii terapeutycznych w przypadku zespołów mielodysplastycznych i wtórnej AML.

Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
ostra białaczka szpikowa
Synonimy
  • SKM1

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Okrągłe komórki
Czas podwojenia
48 godzin

04Identyfikatory

Źródło
SKM-1 (numer katalogowy Cytion 305627)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0098

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
CD3 -, CD4 (+), CD13 +, CD14 -, CD15 +, CD19 -, CD33 +, HLA-DR +;
Profil mutacji
Mutacja: ASXL1, prosta, p.Tyr591Ter (c.1773C>A), homozygotyczna; Mutacja: BCORL1, prosta, c.4619-1G>A, homozygotyczna, mutacja akceptorowa splicingu; Mutacja: EZH2, prosta, p.Tyr646Cys (c.1937A>G), heterozygotyczna; Mutacja: KRAS, prosta, p.Lys117Asn (c.351A>C), homozygotyczna; Mutacja: TP53, prosta, p.Arg248Gln (c.743G>A), homozygotyczna
Wirusy
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 15% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Brak
Gęstość wysiewu
0,3 do 1 x 106 komórek/ml
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
76 lat
Pochodzenie etniczne
Japoński