Prejsť na obsah
SKM-1
Tkanivo
Periférna krv
Choroba
akútna myeloidná leukémia
Synonymá
SKM1

Dokumenty

SKM-1

Cell line · Číslo výrobku 305627

The SKM-1 cell line is a human leukemia model established from the peripheral blood of a patient with acute monoblastic leukemia that developed from myelo...

€500.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka SKM-1 je model ľudskej leukémie vytvorený z periférnej krvi pacienta s akútnou monoblastickou leukémiou, ktorá sa vyvinula z myelodysplastického syndrómu (MDS). Tieto bunky vykazujú nezrelé morfologické znaky, ako je vysoký pomer jadra k cytoplazme a jemné azurofilné granuly, čo z nich robí vynikajúci model na štúdium molekulárnych a bunkových mechanizmov leukémie, najmä prechodu z MDS na akútnu myeloidnú leukémiu (AML).

Genetická analýza SKM-1 odhalila dôležité chromozómové abnormality, vrátane del(9)(q13;q22) a der(17)t(17:?)(p13:?); druhá zmena sa týka génu p53, ktorý je nadmerne exprimovaný a obsahuje mutácie v tejto bunkovej línii. Tieto zistenia zdôrazňujú úlohu p53 v klonálnej evolúcii a progresi myeloidných malignít. Bunky SKM-1 sa tiež vyznačujú expresiou myelomonocytárnych markerov, vrátane CD4, CD13 a CD33, ako aj pozitívnou aktivitou butyrátesterázy, čo zodpovedá ich monoblastickému pôvodu.

Táto bunková línia sa široko používa vo výskume leukemogenézy, rezistencie na lieky a molekulárnych dráh, ktoré sú základom leukémie. Napríklad SKM-1 poskytuje platformu na skúmanie vplyvu dysfunkcie p53 a iných genetických lézií na proliferáciu buniek a terapeutickú odpoveď. Slúži tiež ako model na skúmanie nových terapeutických stratégií pre myelodysplastické syndrómy a sekundárnu AML.

Tkanivo
Periférna krv
Choroba
akútna myeloidná leukémia
Synonymá
  • SKM1

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Okrúhle bunky
Doba zdvojnásobenia
48 hodín

04Identifikátory

Citácia
SKM-1 (číslo katalógu Cytion 305627)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0098

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
CD3 -, CD4 (+), CD13 +, CD14 -, CD15 +, CD19 -, CD33 +, HLA-DR +;
Mutčný profil
Mutácia: ASXL1, jednoduchá, p.Tyr591Ter (c.1773C>A), homozygotná; Mutácia: BCORL1, jednoduchá, c.4619-1G>A, homozygotná, mutácia akceptorového miesta splice; Mutácia: EZH2, jednoduchá, p.Tyr646Cys (c.1937A>G), heterozygotná; Mutácia: KRAS, jednoduchá, p.Lys117Asn (c.351A>C), homozygotná; Mutácia: TP53, jednoduchá, p.Arg248Gln (c.743G>A), homozygotná
Vírusy
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 15 % FBS
Disociačné činidlo
Žiadne
Hustota výsevu
0,3 až 1 x 106 buniek/ml
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
76 rokov
Etnická príslušnosť
Japonský